Metody detekce funkce mitochondrií – Lucie Sochorová

Anotace:

Cílem této bakalářské práce je popis mitochondriálních funkcí a vhodných metod pro jejich detekci. První část bakalářské práce se zabývá původem těchto organel, stavbou jejich membrán a proteiny, které se na membránách vyskytují. Tyto proteiny mají význam v mitochondriální dynamice, jejímž prostřednictvím je udržována buněčná homeostáza. Práce obsahuje přehled mitochondriálních funkcí, jejich význam včetně detailnějšího popisu těch nejdůležitějších. Druhá část práce je soustředěna na hodnocení mitochondriálních funkcí, především s využitím fluorescenčních indikátorů. V práci jsou popsány metody pro detekci membránového potenciálu mitochondrií pomocí nejběžnějších fluorescenčních sond. Další z ukazatelů správné funkce mitochondrií je hladina reaktivních forem kyslíku, způsobující oxidační stres, který má mimo jiné vliv na buněčné stárnutí. V tomto případě jsou porovnávány kromě sond se schopností fluorescence, také chemiluminescenční sondy a cílové proteiny. Část práce je také zaměřena na princip metod, jako jsou konfokální mikroskopie a vysokoúčinná respirometrie. …víceméně

Abstract:

The aim of present work is a description of mitochondrial functions and appropriate methods for their detection. The first part of the thesis deals with the origin of these organelles, building their membranes and membrane proteins. These proteins are important in mitochondrial dynamics due their maintenance of cellular homeostasis. The thesis contains an overview of mitochondrial functions, including detailed description of the most important principles. The second part is focused on the evaluation of mitochondrial function, especially using fluorescent indicators. The thesis describes a method to detect mitochondrial membrane potential with its principles and possible restrictions. The other evaluation of proper function of mitochondria can be the level of reactive oxygen species causing oxidative stress belonging among important inducers of cellular senescence. Part of the work is focused also on the principle of methods, incl.confocal microscopy and high-resolution respirometry. …víceméně