Antimikrobiální aktivita bifidobakterií proti Clostridium perfringens a Clostridium difficile

Bartošáková, Vendula

EN SKPřihlásit se Přihlásit se (EduID)

Theses 6jj0a4

Antimikrobiální aktivita bifidobakterií proti Clostridium perfringens a Clostridium difficile – Bc. Vendula Bartošáková

Bc. Vendula Bartošáková

Diplomová práce

Antimikrobiální aktivita bifidobakterií proti Clostridium perfringens a Clostridium difficile

Antimicrobial activity of bifidobacteria against Clostridium perfringens and Clostridium difficile

Anotace:

Diplomová práce je zaměřena na identifikaci konkrétních druhů bifidobakterií, produkujících antimikrobiální látky, jež potlačují růst nežádoucích střevních patogenů. V teoretické části je podrobněji popsána střevní mikrobiota člověka a s ní spojené infekce trávicího ústrojí, kdy původci onemocnění jsou patogeny z rodu Clostridium. Dále je zde popsána problematika bifidobakterií, které by bylo možné navrhnout jako probiotické bakterie v možnostech prevence a podpory léčby proti gastrointestinálním onemocněním. Hlavním cílem této práce bylo nalezením vhodných kmenů z rodu Bifidobacterium, které by mohly vykazovat antimikrobiální aktivitu proti Clostridium perfringens a Clostridium difficile. Praktická část je složena ze tří experimentů. V první části byla pomocí diskové difúzní metody sledována antimikrobiální aktivita kmenů bifidobakteríí k jednotlivým kmenům klostridií, které se chovají jako patogeny v trávicím traktu. Celkem bylo otestováno 12 kmenů (4 druhy) z rodu Bifidobacterium. Pouze u čtyř kmenů Bifidobacterium animalis subsp. animalis a Bifidobacterium choerinum byla potvrzena antimikrobiální aktivita vytvořením jasných inhibičních zón. Součástí byla i detekce času, v němž dochází k produkci antimikrobiální látky. Dva kmeny vykazující antimikrobiální aktivitu byly přeočkovány a kultivovány. Během kultivace byly odebírány vzorky každé 2 hodiny a opět testovány deskovou difúzní metodou. Bylo zjištěno, že testované kmeny bifidobakterií vykazují stále stejnou antimikrobiální aktivitu. Tato aktivita byla detekována ve stejné míře ihned po přeočkování a i po 36 hodinách kultivace. Z toho vyplývá, že proti klostridiím pravděpodobně funguje látka obsažená v zamraženém médiu. Při použití supernatantů se zamražených vzorků byla navíc antimikrobiální aktivita nejvyšší. Druhá část je věnována testování supernatantů s upravenými vlastnostmi. Je tvořena třemi dílčími pokusy. V prvním případě byla otestována tepelná stabilita pozitivních supernatantů při teplotě 100 °C po dobu 30 minut. V druhém případě byl ověřen vliv změny při hodnotách pH 2, 7, 9. V posledním případě byl otestován přídavek proteinázy K v koncentraci 0,1 mg /1 ml. Bylo zjištěno, že změna teploty a přídavek proteinázy K nemají žádný vliv na antimikrobiální aktivitu bifidobakterií. Pouze při okyselení supernatantu na hodnotu pH 2 došlo k vytvoření znatelně větší inhibiční zóny. Třetí část je taktéž tvořena dvěma dílčími pokusy. Nejprve byly testovány dva vzorky bifidobakterií s pozitivním účinkem pomocí speciálního filtru, aby došlo k separaci případně přítomných proteinů, čímž bylo zjištěno, že se pravděpodobně jedná o látku proteinové povahy. Při druhém pokusu došlo k přídavku tweenu v koncentraci 1 % do modifikovaného Wilkins-Chalgren anaerobic média za účelem podpoření antimikrobiální aktivity a vytvoření většího množství testovaného produktu. Přídavek však neměl žádný vliv na antimikrobiální aktivitu. Z výsledků tohoto testování vyplývá, že některé testované supernatanty druhů B. animalis subsp. animalis a B. choerinum vykazují antimikrobiální aktivitu proti C. perfringens a C. difficile. Nicméně se může také jednat o produkt glycerolu, který je součástí zamražovacího média, kde může být přítomen akrolein, u něhož je znám antimikrobiální efekt. …více

Abstract:

Master´s thesis is focused on the identification of specific species of Bifidobacterium, that produce antimicrobial substances and those suppress the growth of undesirable intestinal pathogens. Theoretical part describes human intestinal microbiota and its associated infections of the digestive tract, where the origins of the disease are pathogens of the genus Clostridium. Further, there is a description of the issue of bifidobacteria, which could be suggested as a probiotic bacteria for the prevention and promotion of treatment of gastrointestinal disease. The main objective of this thesis was to find suitable strains of the genus Bifidobacterium, which might evince antimicrobial activity against Clostridium perfringens and Clostridium difficile. The practical part consists of three experiments. In the first part, an antimicrobial activity of strains of Bifidobacterium to individual strains of clostridia was monitored by disc diffusion method, that behaves like pathogens in the gastrointestinal tract. Totally, there were 12 strains (4 kinds) of the genus Bifidobacterium tested. Only 4 strains of genus Bifidobacterium animalis subsp. animalis and Bifidobacterium choerinum showed the antimicrobial activity confirmed by formation of clear inhibition zones. Tests also included a time detection, which leads to the production of antimicrobial substances. Two strains exhibiting antimicrobial activity were inoculated and culivated. During the cultivation samples were taken every 2 hours and again tested by disc diffusion method. It was found that the tested strains of bifidobacteria show always the same antimicrobial activity. This activity was detected in equal measure immediately after the inoculation, and even after 36 hours of cultivation. This testing show that against to clostridia probably functions substance contained in frozen medium. Moreover a supernatants from frozen samples were able to produce also the highest antimicrobial activity. The second part is dedicated to testing supernatants with modified properties. It consists of three part tests. In the first case the thermal stability of positive supernatants at 100 °C for 30 min was tested. In the second case, the effect of changes at pH 2, 7, 9 was verified. In the last case, the addition of proteinase K to 0,1 mg / 1 ml was tested. It was found, that the change in temperature and addition of proteinase K had no effect on the antimicrobial activity of Bifidobacterium, only the acidification of the supernatant to value pH 2, made considerably larger inhibition zones. The third part also consists of two part tests. First, two samples of Bifidobacterium with positive effects were tested using a special filter in order to separate present proteins, whereby it was found that the material had a protein nature probably. In the second experiment a tween in a concentration of 1% was added to the modified Wilkins-Chalgren anaerobic medium to enhance the antimicrobial activity. However, the addition had no effect on antimicrobial activity and making more test product. The results of this testing showed, that some from tested supernatants of B. animalis subsp. animalis and B. choerinum exhibit antimicrobial activity against C. perfringens and C. difficile. However, it may be a product of glycerol, which is part of the frozen media, there can be present an acrolein, which is known for antimicrobial effect. …více

Klíčová slova

Klostridie bifidobakterie inhibice antimikrobiální aktivita bakteriociny

Keywords

bifidobacteria inhibition Clostridia antimicrobial activity bacteriocins

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 12. 4. 2017

Obhajoba závěrečné práce

Vedoucí: Ing. Věra Bunešová, Ph.D.
Oponent: Jana Smolová, externi

Citační záznam

Citovat tuto práci

Citace dle ISO 690:

BARTOŠÁKOVÁ, Vendula. \textit{Antimikrobiální aktivita bifidobakterií proti Clostridium perfringens a Clostridium difficile}. Online. Diplomová práce. Praha: Česká zemědělská univerzita v Praze, Fakulta agrobiologie, potravinových a přírodních zdrojů. 2017. Dostupné z: https://theses.cz/id/6jj0a4/.

@MastersThesis{Bartosakova2017thesis,
AUTHOR = "Bartošáková, Vendula",
TITLE = "Antimikrobiální aktivita bifidobakterií proti Clostridium perfringens a Clostridium difficile [online]",
YEAR = "2017 [cit. 2024-06-30]",
TYPE = "Diplomová práce",
SCHOOL = "Česká zemědělská univerzita v Praze, Fakulta agrobiologie, potravinových a přírodních zdrojůPraha",
NOTE = "SUPERVISOR: Ing. Věra Bunešová, Ph.D.",
URL = "https://theses.cz/id/6jj0a4/",
}

@MastersThesis{Bartosakova2017thesis,
AUTHOR = {Bartošáková, Vendula},
TITLE = {Antimikrobiální aktivita bifidobakterií proti Clostridium perfringens a Clostridium difficile},
YEAR = {2017},
TYPE = {Diplomová práce},
INSTITUTION = {Česká zemědělská univerzita v Praze, Fakulta agrobiologie, potravinových a přírodních zdrojů},
LOCATION = {Praha},
SUPERVISOR = {Ing. Věra Bunešová, Ph.D.},
URL = {https://theses.cz/id/6jj0a4/},
URL_DATE = {2024-06-30},
}

{{Citace kvalifikační práce
 | příjmení = Bartošáková
 | jméno = Vendula
 | instituce = Česká zemědělská univerzita v Praze, Fakulta agrobiologie, potravinových a přírodních zdrojů
 | titul = Antimikrobiální aktivita bifidobakterií proti Clostridium perfringens a Clostridium difficile
 | url = https://theses.cz/id/6jj0a4/
 | typ práce = Diplomová práce
 | vedoucí = Ing. Věra Bunešová, Ph.D.
 | rok = 2017
 | počet stran =
 | strany =
 | citace = 2024-06-30
 | poznámka =
 | jazyk = 
}}

Plný text práce

Obsah online archivu závěrečné práce

Zveřejněno v Theses:

světu

Jak jinak získat přístup k textu

Instituce archivující a zpřístupňující práci: Česká zemědělská univerzita v Praze, Fakulta agrobiologie, potravinových a přírodních zdrojů

Odkaz na adresář do lokálního úložiště instituce

Česká zemědělská univerzita v Praze

Fakulta agrobiologie, potravinových a přírodních zdrojů

Magisterský studijní program / obor:
Výživa a potraviny / Výživa a potraviny

Práce na příbuzné téma

Antimikrobiální aktivita extraktů z kopřivy dvoudomé (Urtica dioica)
Július Zemaník
Antimikrobiální aktivita extraktů z řepíku lékařského (Agrimonia eupatoria)
Viktor Bartošík
Antimikrobiální aktivita hemolymfy včely medonosné, Apis mellifera L.
Miroslav Vacl
Antibakteriální aktivita a synergický potenciál fenolických sloučenin z kůry kořenů Morus alba
Gabriela Škovranová

Název

Vložil

Vloženo

Práva

Theses 6jj0a4 6jj0a4/2

13. 4. 2017

Složky

Soubory

thesis zaverecna_prace.pdf

Mach, J.

13. 4. 2017

Co je jinak přidání souboru

Soubor nebo složku lze nahrát pomocí tlačítka Přidat.
Co je jinak další operace se soubory

Podrobnosti lze zjistit označením příslušného řádku.
Co je jinak pohled pro experty

Pro častou práci je možné zvolit režim Více možností.
Co je nové vyhledávání souborů

Vyhledávaný výraz můžete zadat přímo do adresního řádku.
Co je nové rychlý přístup k souborům

Pomocí funkce Nedávné je možné se rychle vrátit k právě prohlíženým souborům. Oblíbené soubory je také možné označit Hvězdičkou.
Co se chystá

Připravujeme další vylepšení pro mobilní zařízení.

Antimikrobiální aktivita bifidobakterií proti Clostridium perfringens a Clostridium difficile – Bc. Vendula Bartošáková

Bc. Vendula Bartošáková

Diplomová práce

Antimikrobiální aktivita bifidobakterií proti Clostridium perfringens a Clostridium difficile

Antimicrobial activity of bifidobacteria against Clostridium perfringens and Clostridium difficile

Anotace:

Abstract:

Klíčová slova

Keywords

Obhajoba závěrečné práce

Citační záznam

Citace dle ISO 690:

Plný text práce

Obsah online archivu závěrečné práce

Jak jinak získat přístup k textu

Česká zemědělská univerzita v Praze

Práce na příbuzné téma

Složky

Soubory

Co je jinak přidání souboru

Co je jinak další operace se soubory

Co je jinak pohled pro experty

Co je nové vyhledávání souborů

Co je nové rychlý přístup k souborům

Co se chystá