Porovnání kompozice terminálních sacharidů zony pellucidy u prepubertálních a pohlavně dospělých prasnic

Stepanov, Semen

EN SKPřihlásit se Přihlásit se (EduID)

Theses.cz

Theses 8c65kr

Porovnání kompozice terminálních sacharidů zony pellucidy u prepubertálních a pohlavně dospělých prasnic – Bc. Semen Stepanov

Bc. Semen Stepanov

Diplomová práce

Porovnání kompozice terminálních sacharidů zony pellucidy u prepubertálních a pohlavně dospělých prasnic

Comparison of terminal carbohydrate composition of the zona pellucida in prepubertal and sexually mature sows

Anotace:

Zona pellucida (ZP) je důležitá extracelulární glykoproteinová vrstva, která obklopuje oocyt savců a plní významné role v procesech oogeneze, oplození a časného embryonálního vývoje. Díky svému uspořádání a struktuře je mimo jiné zapojena i do druhově specifické interakce mezi spermií a vajíčkem. Klíčovou roli zde hrají především její posttranslační modifikace, mezi které patří i četné glykosylace. Právě unikátní skladba sacharidů v řetězci glykoproteinů je s největší pravděpodobností zodpovědná za tuto druhově specifickou interakci spermie s vajíčkem. Přesné mechanizmy však nejsou u prasečího modelu dostatečně objasněny. Není také známo v jaké fázi vývoje oocytu dochází ke vzniku konečné podoby glykosylačního vzoru na zoně pellucidě prasečích oocytů. Pro svou snažší dostupnost jsou pro experimenty reprodukčních biotechnologií častěji využívány oocyty získané z vaječníků prepubertálních prasnic. Ty však nemusejí ještě nést konečný vzor glykosylací na své zoně pellucidě. Velmi významným momentem může být v této souvislosti zapojení pohlavních hormonů (luteinizačního a folikulostimulačního), jejichž hladiny se cyklicky zvyšují až s nástupem pohlavní dospělosti. Zda je rozdíl ve vzoru glykosylací glykoproteinů zony pellucidy oocytů získaných z prepubertálních nebo z pohlavně dospělých prasnic není doposud detailně popsáno. Cílem této diplomové práce bylo ověřit hypotézu, že kompozice terminálních sacharidů zony pellucidy oocytů se mezi prepubertálními a pohlavně dospělými prasnicemi liší. K ověření této hypotézy byly provedeny tři experimenty, které byly zaměřeny na detekci vybraných sacharidových struktur, konkrétně na detekci kyseliny sialové, N-acetylglukosaminu (GlcNAc) a manózy, u kterých se předpokládá jejich zapojení v druhově specifické vazbě spermie na vajíčko, a to pomocí vhodně zvolených lektinů: WGA k detekci kyseliny sialové, sWGA k detekci N-acetylglukosaminu (GlcNAc) a GNL k detekci manózy. Realizovanými experimenty se nepodařilo ověřit naši hypotézu. Nebyl pozorován statisticky významný rozdíl v relativní intenzitě signálu ani u jednoho ze zvolených lektinů (WGA, sWGA a GNL) mezi skupinou oocytů získanou z vaječníků prepubertálních prasnic a skupinou oocytů získaných z vaječníků pohlavně dospělých prasnic. Kompletní posttranslační modifikace glykoproteinů zona pellucida tedy pravděpodobně probíhají již v růstové fázi oocytu a nástup činnosti pohlavních hormonů v období puberty prasnice není do tohoto procesu zapojen. Bylo by ještě vhodné doplnit získané výsledky sledováním přítomnosti a aktivity konkrétních enzymů, které se na těchto modifikacích podílejí (například neuraminidázy a různých transferáz). …více

Abstract:

The zona pellucida (ZP) is an important extracellular glycoprotein layer that surrounds the mammalian oocyte and plays a significant role in the processes of oogenesis, fertilization, and early embryonic development. Due to its specific arrangement and structure, it is also involved in species-specific interactions between the sperm and the oocyte. A key factor in this interaction is the set of post-translational modifications of ZP glycoproteins, particularly their extensive glycosylation. The unique composition of carbohydrate moieties on the glycoprotein chains is most likely responsible for the species-specific sperm–oocyte binding. However, the precise mechanisms underlying these interactions remain unclear in the porcine model. Furthermore, it is not yet known at which stage of oocyte development the final glycosylation pattern of the zona pellucida is established in pig oocytes. Due to their easier availability, oocytes from prepubertal gilts are more commonly used in experiments involving reproductive biotechnologies. However, these oocytes may not yet carry the final glycosylation pattern on their zona pellucida. The involvement of sex hormones—luteinizing hormone (LH) and follicle-stimulating hormone (FSH)—which rise cyclically with the onset of sexual maturity, may be of particular importance in this context. To date, it has not been clearly described whether there is a difference in the glycosylation pattern of zona pellucida glycoproteins between oocytes obtained from prepubertal and sexually mature pigs. The aim of this diploma thesis was to test the hypothesis that the composition of terminal carbohydrates in the zona pellucida of oocytes differs between prepubertal and sexually mature gilts. To verify this hypothesis, three experiments were carried out focusing on the detection of selected carbohydrate structures—specifically sialic acid, N-acetylglucosamine (GlcNAc), and mannose—believed to be involved in species-specific sperm–oocyte recognition. The detection was performed using specific lectins: WGA for sialic acid, sWGA for N-acetylglucosamine (GlcNAc), and GNL for mannose. The conducted experiments did not confirm our hypothesis. No statistically significant differences were observed in the relative signal intensity of any of the selected lectins (WGA, sWGA, and GNL) between the group of oocytes obtained from prepubertal ovaries and those from sexually mature pigs. This suggests that the complete post-translational modification of zona pellucida glycoproteins likely occurs during the oocyte growth phase, and that the hormonal changes associated with puberty do not play a critical role in this process. To further support these findings, it would be beneficial to investigate the presence and activity of specific enzymes involved in these modifications—such as neuraminidases and various transferases. …více

Klíčová slova

glykoproteiny lektiny oocyt oogeneze prase zona pellucida

Keywords

oogenesis porcine glykans lectins oocyte zona pellucida

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 27. 4. 2025

Obhajoba závěrečné práce

Obhajoba proběhla 20. 5. 2025
Vedoucí: Mgr. Ing. Tereza Krejčová, Ph.D.
Oponent: Marta Homutová, externi

Citační záznam

Citovat tuto práci

Citace dle ISO 690:

STEPANOV, Semen. \textit{Porovnání kompozice terminálních sacharidů zony pellucidy u prepubertálních a pohlavně dospělých prasnic}. Online. Diplomová práce. Praha: Česká zemědělská univerzita v Praze, Fakulta agrobiologie, potravinových a přírodních zdrojů. 2025. Dostupné z: https://theses.cz/id/8c65kr/.

@MastersThesis{Stepanov2025thesis,
AUTHOR = "Stepanov, Semen",
TITLE = "Porovnání kompozice terminálních sacharidů zony pellucidy u prepubertálních a pohlavně dospělých prasnic [online]",
YEAR = "2025 [cit. 2026-09-24]",
TYPE = "Diplomová práce",
SCHOOL = "Česká zemědělská univerzita v Praze, Fakulta agrobiologie, potravinových a přírodních zdrojůPraha",
NOTE = "SUPERVISOR: Mgr. Ing. Tereza Krejčová, Ph.D.",
URL = "https://theses.cz/id/8c65kr/",
}

@MastersThesis{Stepanov2025thesis,
AUTHOR = {Stepanov, Semen},
TITLE = {Porovnání kompozice terminálních sacharidů zony pellucidy u prepubertálních a pohlavně dospělých prasnic},
YEAR = {2025},
TYPE = {Diplomová práce},
INSTITUTION = {Česká zemědělská univerzita v Praze, Fakulta agrobiologie, potravinových a přírodních zdrojů},
LOCATION = {Praha},
SUPERVISOR = {Mgr. Ing. Tereza Krejčová, Ph.D.},
URL = {https://theses.cz/id/8c65kr/},
URL_DATE = {2026-09-24},
}

{{Citace kvalifikační práce
 | příjmení = Stepanov
 | jméno = Semen
 | instituce = Česká zemědělská univerzita v Praze, Fakulta agrobiologie, potravinových a přírodních zdrojů
 | titul = Porovnání kompozice terminálních sacharidů zony pellucidy u prepubertálních a pohlavně dospělých prasnic
 | url = https://theses.cz/id/8c65kr/
 | typ práce = Diplomová práce
 | vedoucí = Mgr. Ing. Tereza Krejčová, Ph.D.
 | rok = 2025
 | počet stran =
 | strany =
 | citace = 2026-09-24
 | poznámka =
 | jazyk = 
}}

Plný text práce

Obsah online archivu závěrečné práce

Zveřejněno v Theses:

světu

Jak jinak získat přístup k textu

Instituce archivující a zpřístupňující práci: Česká zemědělská univerzita v Praze, Fakulta agrobiologie, potravinových a přírodních zdrojů

Odkaz na adresář do lokálního úložiště instituce

Česká zemědělská univerzita v Praze

Fakulta agrobiologie, potravinových a přírodních zdrojů

Magisterský studijní program / specializace:
Biotechnologie / Reprodukční biotechnologie

Práce na příbuzné téma

Studium povrchových proteinů spermií se zona pellucida vazající aktivitou
Eliška Kaufmanová
Exprese vybraných fúzních proteinů na membráně oocytu prasete
Petra Bednářová
Detekce galaktosylových struktur zony pellucidy oocytů prasete
Veronika Dřevová
Metodologické přístupy při studiu vazby spermie na zona pellucida oocytu prasete
Alexandra Marešová
Detekce N-acetylglukosaminových struktur zony pellucidy oocytů prasete
Veronika Zárubová
Využití imunometod elektronové mikroskopie pro intracelulární lokalizaci sulfanu produkujících enzymů v oocytech prasete.
Anna Chyská
Úloha oxidu uhelnatého během stárnutí oocytu prasete
Nikola Strachová
Lokalizace vybraných apoptotických markerů v dozrálých a časně stárnoucích oocytech prasete ovlivněných donory sulfanu
Kristýna Melounová

Všechny práce

Název

Vložil

Vloženo

Práva

Theses 8c65kr 8c65kr/2

26. 4. 2025

Složky

Soubory

thesis zaverecna_prace.pdf_

Mach, J.

26. 4. 2025

Přidání souboru

Soubor nebo složku lze nahrát pomocí tlačítka Přidat.
Další operace se soubory

Podrobnosti lze zjistit označením příslušného řádku.
Pohled pro experty

Pro častou práci je možné zvolit režim Více možností.
Vyhledávání souborů

Vyhledávaný výraz můžete zadat přímo do adresního řádku.
Rychlý přístup k souborům

Pomocí funkce Nedávné je možné se rychle vrátit k právě prohlíženým souborům. Oblíbené soubory je také možné označit Hvězdičkou.

Porovnání kompozice terminálních sacharidů zony pellucidy u prepubertálních a pohlavně dospělých prasnic – Bc. Semen Stepanov

Bc. Semen Stepanov

Diplomová práce

Porovnání kompozice terminálních sacharidů zony pellucidy u prepubertálních a pohlavně dospělých prasnic

Comparison of terminal carbohydrate composition of the zona pellucida in prepubertal and sexually mature sows

Anotace:

Abstract:

Klíčová slova

Keywords

Obhajoba závěrečné práce

Citační záznam

Citace dle ISO 690:

Plný text práce

Obsah online archivu závěrečné práce

Jak jinak získat přístup k textu

Česká zemědělská univerzita v Praze

Práce na příbuzné téma

Složky

Soubory

Přidání souboru

Další operace se soubory

Pohled pro experty

Vyhledávání souborů

Rychlý přístup k souborům