Faktory ovlivňující měření koncentrace a čistoty DNA – Gabriela NÁVRATOVÁ

Anotace:

Nukleové kyseliny jsou nenahraditelnou složkou každého živého organismu. Je v nich uchována genetická informace organismu, rovněž jeho vlastnosti a vzhled. Přesto existuje mnoho informací, které o nich ještě nevíme. Proto byly vyvinuty molekulárně biologické metody, které se zabývají právě studiem nukleových kyselin, respektive DNA, jejich izolací, detekcí, sekvenováním atd. Abychom mohli nukleové kyseliny zkoumat, je nutné je očistit od všech nežádoucích složek. Dřívější metody izolace a purifikace DNA byly časově velmi náročné a výtěžnost těchto metod byla nízká, proto vznikají nové postupy a metody, které by nebyly tak pracné a časově náročné. V rámci této bakalářské práce byly popsány metody izolace a detekce DNA, se zaměřením na nově se vyvíjející metody izolace DNA. Dále byly studovány fyzikální faktory, ovlivňující měření koncentrace a čistoty DNA. V praktické části práce pak byla studována závislost metody izolace a fyzikálních faktorů na výsledné koncentraci a čistotě vzorků DNA. K izolaci DNA byla použita kolonková metoda a separace pomocí paramagnetických částic. …víceméně

Abstract:

Nucleic acids are irreplaceable components of all known living organisms. They contain the genetic information of the organism as well as its attributes and appearance. Still, there is a lot of information we do not know about them. Therefore techniques of molecular biology were developed, they study nucleic acids, more precisely DNA, their isolation, detection, sequencing etc. In order to examine nucleic acids, we have to make them clean off all the undesirable elements. Former methods of isolation and purification of DNA were very time consuming and their yield low, that is why new procedures and methods are created which would not be so heavy going and time consuming. In this bachelor thesis methods of isolation and detection of DNA were described, paying attention to newly developed methods of isolation of DNA. Then physical factors which have an influence on the measurment of concentration and purity of DNA were studied. In the practical part dependency of the method of isolation and physical factors on the final concentration and purity of DNA was studied. For the isolation of DNA was used column method and the separation using paramagnetic particles. …víceméně