Oxidace proteinů během buněčné diferenciace – Eliška BECHNÁ

Abstract:

Současná studie se zabývá premonocytární lidskou buněčnou linií U937, která byla izolovaná z pacientova histiocytického myelomu. V závislosti na prostředí mají monocyty schopnost se diferenciovat na dendritické buňky či makrofágy. Při diferenciaci na makrofágy, která byla v této studii navozena pomocí phorbol 12-myristát-13-acetátu (PMA), dochází ke vzniku reaktivních forem kyslíku. Během buněčné diferenciace došlo k morfologickým změnám, které byly následně vizualizovány pomocí konfokální laserové skenovací mikroskopie (CLSM). Dále jsem pomocí elektronové paramagnetické rezonance (EPR) byla schopna v buněčné linii detekovat produkci hydroxylového radikálu (HO-). Díky western blot analýze bylo zjištěno, že produkce reaktivních forem kyslíku vedla k oxidaci proteinů, které byly vizualizovány pomocí protilátkami proti markeru oxidačního stresu - malondialdehydu (MDA). Hlavním cílem této práce je rozšíření znalostí o tvorbě reaktivních forem kyslíku v lidské leukemické buněčné linii U937. …víceméně

Abstract:

The current study focuses on the pro-monocytic human cell line U937, which was isolated from a patient's histiocytic myeloma. Depending on the environment, monocytes can differentiate into dendritic cells or macrophages. The differentiation into macrophages, which in this study was induced by phorbol 12-myristate-13-acetate (PMA), results in the formation of reactive oxygen species. During cell differentiation, morphological changes occurred, and these were visualized by confocal laser scanning microscopy (CLSM). Furthermore, using electron paramagnetic resonance (EPR), I was able to detect hydroxyl radical (HO-) production in the cell line. On the basis of Western blot analysis, it was found that ROS production led to protein oxidation, which was visualized by antibodies against malondialdehyde (MDA), a marker of oxidative stress. The main aim of this work is to extend the knowledge of ROS production in the human leukemia cell line U937. …víceméně