Biosyntéza aromatických cytokininů – Pavel Jaworek

Anotace:

Aromatické cytokininy byly dlouhou dobu považovány za čistě syntetické látky a doposud nebyla rozluštěna jejich biosyntéza. Tato práce měla za úkol ověřit, zda na počátku jejich vzniku stojí fenylalanin. Studium bylo provedeno na buněčné suspenzní kultuře Chenopodium rubrum s využitím fenylalaninu značeného tritiem. V biologickém materiálu byly přirozeně se vyskytující cytokininy kvantifikovány ultraúčinnou kapalinovou chromatografií ve spojení s tandemovou hmotnostní spektrometrií. Obdobný analytický systém byl použit pro identifikaci fenolických kyselin. Jejich přítomnost v buněčné kultuře je známkou zachování sekundárního metabolismu aromatických látek. Finálním experimentem bylo změření míry inkorporace značeného fenylalaninu do aromatických cytokininů. Purifikovaný vzorek byl pomocí vysokoúčinné kapalinové chromatografie rozdělen na frakce, ve kterých byla radioaktivita změřena na scintilačním počítači …víceméně

Abstract:

Aromatic cytokinins were considered to be purely synthetic compounds for long time and their biosynthetic pathway still remains unsolved. Main object of this work was to determine whether phenylalanine is their precursor or not. Experimental procedure was carried on cell suspension culture of Chenopodium rubrum feeded with tritium labelled phenylalanine. Informations about cytokinins levels in plant material were obtained by ultra-performance liquid chromatography coupled with tandem mass spectrometry. The same analytical technique was also used for identification of phenolic acids. Their presence in cell culture means that the secondary metabolism of aromatic compounds is maintained. In the final stage, high-performance liquid chromatography separation of purified sample provided fractions for radioactivity measurment to determine the rate of phenylalanine incorporation to aromatic cytokinins …víceméně