Studium mutantních forem nukleosid-N-ribohydrolasy 3 z kukuřice (Zea mays)

Bc. Lucie POPOVIČOVÁ

Diplomová práce

Study of mutant forms of nucleoside-N-3 ribohydrolasy maize (Zea mays)

Anotace:

Tato práce se věnuje cílené mutagenezi nukleosid-N-ribohydrolasy 3 z kukuřice seté (ZmNRH3) a následné charakterizaci několika mutantních forem. Cílem v teoretické části práce bylo zpracovat přehlednou rešerši, která bude zahrnovat metabolismus purinů a pyrimidinů v rostlinách a dále přítomnost a funkci dosud popsaných nukleosid-N-ribohydrolas v různých organismech. V praktické části této práce bylo provedeno klonování, místně cílená mutageneze, exprese ZmNRH3 v buňkách E. coli, purifikace rekombinantního proteinu ZmNRH3-WT a dalších 7 mutantních forem K279A, W226A, W226Y, Y231A, Y231D, H81A a H239A.

Abstract:

This master thesis focuses on site-directed mutagenesis of nucleoside-N-ribohydrolase 3 from maize (ZmNRH3) and subsequent characterization of several mutant forms. The aim of the theoretical part is to provide a literature review, which will cover purine and pyrimidine metabolism in plants and the presence and function of previously described nucleoside-N-ribohydrolases in various organisms. In the experimental part of this work, cloning, site-directed mutagenesis of ZmNRH3 and the expression in E. coli were performed followed by purification of recombinant protein ZmNRH3-WT and other seven mutant variants K279A, W226A, W226Y, Y231A, Y231D, H81A and H239A.

Klíčová slova

Kukuřice, místně cílená mutageneze, pyrimidin, purin, nukleosid-N-ribohydrolasa, metabolismus

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 24. 7. 2015

Zveřejnit od: 24. 7. 2015

Obhajoba závěrečné práce

• Vedoucí: Mgr. David Kopečný, Ph.D.

UNIVERZITA PALACKÉHO V OLOMOUCI

Přírodovědecká fakulta

Magisterský studijní program / obor:
Biochemie / Biochemie