Detekce CD14+ mononukleárních buněk metodou průtokové cytometrie.

Andrea ONDRUŠÍKOVÁ

Bachelor's thesis

Detection of CD14 + mononuclear cells by flow cytometry.

Abstract:

Tato bakalářská práce se zabývá studiem mononukleárních buněk imunitního systému. Pozornost je především věnována buňkám monocyto-makrofágové linie, které na svém povrchu exprimují receptor CD14. Receptor CD14 se podílí na spuštění signálních drah, které vedou k produkci prozánětlivých faktorů. Hlavním cílem bakalářské práce je zavedení metodik umožňujících separaci CD14+ mononukleárních buněk. Správnost separace je ověřena detekcí buněk průtokovým cytometrem. Pro separaci CD14+ mononukleárních buněk je použita metoda gradientové centrifugace v hustotním gradientu a metoda imuno-magnetické separace za pomocí magnetických kuliček. Zavedením a osvojením si metodik separace je dílčím krokem pro identifikaci a kvantifikaci prozánětlivých faktorů, které lze využít při hodnocení systémových metabolických změn a patofyziologických stavů provázející obezitu a metabolický syndrom.

Abstract:

This bachelor thesis deals with a study of the mononuclear cells immune system. Attention is primarily paid to the cells of the monocyte-macrophage lineage, which express on their surface the CD14 receptor. The CD14 receptor is involved on launching of the signaling pathways that lead to the production of pro-inflammatory factors. The main objective of this thesis is to implement methodologies enabling separation of CD14+ mononuclear cells. The accuracy of separation is verified by detecting the cells by flow cytometry. For CD14+ mononuclear cells separation is used method of gradient centrifugation and method of immunomagnetic separation using magnetic beads. The introduction and mastering of separation methodologies is a substep for the identification and the quantification of inflammatory factors which may be used in assessing the systematic metabolic changes and pathophysiological conditions accompanying obesity and metabolic syndrome.

Keywords

mononukleární buňky, CD14, průtokový cytometr, gradientová centrifugace, imuno-magnetická separace

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 24. 4. 2015

Accessible from:: 24. 4. 2015

Thesis defence

• Date of defence: 18. 5. 2015
• Supervisor: Mgr. Michal Haluzík, Ph.D.

University of Ostrava

Faculty of Science

Bachelor programme / field:
Biology / Experimental Biology