Analýza bunkového cyklu u buniek myelómových línií ovplyvnených polosendvičovými komplexmi ruthenia a osmia

Bc. Katarína ONDRUŠKOVÁ

Master's thesis

Cell cycle analysis of myeoloma cell lines treated with half-sandwich Ru(II) and Os(II) complexes

Abstract:

Diplomová práca je zameraná na analýzu bunkového cyklu u buniek myelómových bunkových línií KMS12-BM a KMS12-PE ovplyvnených novo syntetizovanými polosendvičovými komplexmi ruthenia a osmia. Teoretická časť je zameraná na bunkový cyklus, jeho reguláciu a kontrolu. Zároveň je spracovaná problematika poškodenia DNA a možnosti opráv. Posledná časť teórie sa venuje základnej charakteristike ochorenia mnohopočetného myelómu a možnosti liečby. Experimentálna časť sa zoberala účinkom nových testovaných látok na bunky myelómových bunkových línií. Najskôr boli zistené hodnoty IC50 pre každú testovanú látku v oboch myelómových bunkových líniách. Ďalej bola vykonaná analýza bunkového cyklu buniek ovplyvnených testovanými látkami pomocou prietokovej cytometrie. Následne boli vykonané podrobnejšie experimenty zahŕňajúce expresnú analýzu génov CDKN2B (p15INK4b), CDKN2A (p16INK4a) a CDKN1A (p21WAF1/CIP1). Získané výsledky boli porovnané medzi sesterskými myelómovými bunkovými líniami. Na základe získaných výsledkov je možné tvrdiť, že testované látky vo vykonaných experimentoch ukázali možný liečebný potenciál a pre lepšie pochopenie účinku testovaných látok je potrebné vykonať podrobné experimenty. Výsledky tiež potvrdili skutočnosť, že sesterské myelómové bunkové línie majú odlišný typ biologickej odpovedi a reagujú na testované látky rozdielne.

Abstract:

Master thesis is aimed on cell cycle analysis of multiple myeloma cell lines KMS12-BM and KMS12-PE which were treated with new synthesized half-sandwich Ru(II) and Os(II) complexes. In theoretical part, cell cycle analysis, its regulation and control system are elaborated. At the same time, topic of DNA damage and reparation possibilities are mentioned. The last part of theory characterizes multiple myeloma diseases and treatment methods. In the experimental part, effects of tested compounds on multiple myeloma cell lines were determined. At first, IC50 values for every substance and for both multiple myeloma cell lines were found. Then, cell cycles were analysed using flow cytometry. The last part of experiments was gene expression analysis where genes CDKN2B (p15INK4b), CDKN2A (p16INK4a) a CDKN1A (p21WAF1/CIP1) were observed. The obtained results were compared in two myeloma cell lines. The tested substances showed potential for myeloma cells treatment, however more experiments in details are needed to better understand their effect. It was also confirmed that sister multiple myeloma cell lines act differently and reactions to tested substances were different.

Keywords

bunkový cyklus, fáza G1, S G2/M a sub-G1 kontrolné body bunkového cyklu, mnohopočetný myelóm

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 27. 4. 2023

Thesis defence

• Supervisor: Ing. Kateřina Smešný Trtková, CSc.

Palacký University Olomouc

Faculty of Science

Master programme / field:
Molecular and Cell Biology / Molecular and Cell Biology