Vliv olejů s rozdílným složením polynenasycených mastných kyselin na vybrané imunologické markery u modelového organizmu

Bc. Radka Křikavová

Master's thesis

Influence of oils with a different composition of polyunsaturated fatty acids on selected immunological markers in the model organism

Abstract:

Cílem této diplomové práce bylo sledovat, jak polynenasycené mastné kyseliny ovlivňují proces hojení ran. Tento vliv byl sledován pomocí exprese vybraných genů a kolagenu typu I a III u modelového organismu. Jako modelový organismus byl zvolen potkan laboratorního kmene Wistar Albino. Pro experiment bylo použito 50 potkanů. Potkani byli rozděleni do pěti skupin po deseti kusech. Byla zvolena jedna kontrolní skupina, která byla krmená pouze krmnou směsí bez přídavku oleje. Potkanům ve zby-lých skupinách byla podávána krmná směs s přídavkem oleje (olej z extraktu řas Schi-zochytrium, rybí olej, palmový olej a světlicový olej). Po 52 dnech výkrmu byly potka-nům pod narkózou provedeny excize na dorzální straně hřbetu. Výkrm pokračoval ještě 12 dní a pak byli potkani usmrceni isofluranem a byla jim odebrána játra a hojící se kožní rány. Z odebraných jater byla stanovena depozice EPA/DHA. Z hojící se kožní rány byla získána RNA pro kvantitativní PCR se specifickými primery pro TGF-β1, PTGS2, ACTA2, VEGF, COL1A1, COL3A1. A Dále byly z hojící se kožní rány vytvořeny imunohistochemické řezy s monoklonálními protilátkami pro kolagen typu I a III. Předpoklad dosažení lepších výsledků s olejem s vysokým obsahem DHA nebyl povtr-zen. Nejlepších výsledků v procesu hojení ran bylo dosaženo u potkanů krmených kr-mivem s přídavkem světlicového a rybího oleje (p < 0,05). Tyto výsledky jsou v rozporu s literaturou, protože se předpokládalo, že pouze PUFA n-3 přispívají k lepšímu průběhu hojení ran a PUFA n-6 naopak hojení ran prodlužují. Nejednoznačné výsledky ohledně použití PUFA n-3 v procesu hojení ran si vyžadují další výzkumy.

Abstract:

The aim of this thesis was to observe how polyunsaturated fatty acids affect the wound healing process. This effect was observed by expression of selected genes and collagen type I and III in the model organism. The Wistar Albino laboratory rat strain was chosen as a model organism. 50 rats were used for the experiment. Rats were divi-ded into five groups of ten. One control group was selected which was fed only with compound feed without the addition of oil. The rats in the remaining groups were fed a feed mixture with the addition of oil (Schizochytrium extract oil, fish oil, palm oil and safflower oil). After 52 days of fattening, rats under anesthesia were excised on the dor-sal side of the back. Fattening was continued for 12 days and then rats were sacrificed with isoflurane to remove liver and healing skin wounds. EPA / DHA deposition was determined from collected liver. RNA was obtained from healing skin wounds for quan-titative PCR with specific primers for TGF-β1, PTGS2, ACTA2, VEGF, COL1A1, COL3A1. Further, immunohistochemical sections with type I and III collagen monoclo-nal antibodies were generated from the healing skin wound. The assumption of achie-ving better results with high DHA oil was not lost. Best results in the wound healing process were achieved in rats fed with safflower and fish oil (p <0.05). These results are inconsistent with the literature, since it was assumed that only n-3 PUFAs contribute to a better wound healing process and n-6 PUFAs, on the other hand, prolong wound hea-ling. Ambiguous results regarding the use of n-3 PUFAs in the wound healing process require further research.

Keywords

polynenasycené mastné kyseliny, hojení ran, eikosanoidy, exprese genů

Keywords

polyunsaturated fatty acids, wound healing, eicosanoides, gene expression

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 24. 4. 2019

Thesis defence

• Supervisor: prof. MVDr. Ing. Tomáš Komprda, CSc.
• Reader: Michal Kosař, Ph.D.

Mendel University in Brno

Faculty of AgriSciences

Master programme / field:
Chemistry and Food Technology / Ecotrophology