Různé přístupy genetického testování Leidenské mutace

Markéta HÁJKOVÁ

Bachelor's thesis

Different approaches to genetic testing of Leiden mutation

Anotácia:

Předkládaná bakalářská práce se zabývá různými přístupy genetického testování Leidenské mutace. Leidenská mutace (faktor V Leiden) je v současné době jedna z nejčastějších hereditárních příčin trombofilních stavů a její vyšetření jedno z nejčastěji požadovaných v rámci trombofilních mutací. Trombofilní stavy jsou vážnou zdravotní komplikací, kdy dochází nejčastěji k hluboké žilní trombóze tedy tvorbě sraženiny v hlubokém žilním systému dolních končetin. Tento stav může způsobovat komplikace zejména v těhotenství, ale může mít vážné následky i pro jinak zdravého člověka. Vyšetření Leidenské mutace je buď indikováno za určitých podmínek lékařem, a v tomto případě je hrazeno z veřejného zdravotního pojištění, nebo si jej pacient hradí sám jako samoplátce. Cílem teoretické části této práce je podat ucelenou informaci o fyziologii hemostázy, aby bylo možné pochopit mechanismus tohoto systému, dále o dědičnosti Leidenské mutace, rizicích, které jsou s ní spojeny a o pravidlech indikace ke genetickému vyšetření této mutace. Je zde popsáno i riziko související s užíváním hormonální antikoncepce a vznikem trombofilních stavů. V neposlední řadě se zabývá různými genetickými metodami, které lze pro detekci Leidenské mutace použít. Praktická část obsahuje vlastní postup genetických metod a výsledky takto získané. V rámci bakalářské práce byly použity metody RFLP-PCR, real-time PCR a reverzní hybridizace na stripech. Součástí výsledků je také statistické zpracování rozdílné koncentrace DNA získané izolací z periferní krve nebo z bukálního stěru a statistický přehled o záchytu Leidenské mutace během několika let v laboratoři GENLABS s. r. o. Nosiči této mutace mají větší riziko vzniku trombóz, které mohou mít závažné následky, včetně plicní embolie nebo infarktu myokardu. Jedinci s touto mutací mohou být jak heterozygoti, tak homozygoti. Heterozygoti jsou rizikem trombóz postiženi 5x 10x více než zdravý jedinec, zatímco homozygoti mají toto riziko 80x - 100x vyšší. Ve světové populaci je Leidenská mutace rozprostřena nerovnoměrně, obecně můžeme říct, že v bílé populaci je její výskyt až 15%, zatímco v černošské a asijské populaci se nevyskytuje téměř vůbec. V České republice je její výskyt odhadován asi na 5%.

Abstract:

This thesis is about various approaches to genetical testing of Factor V Leiden. Factor V Leiden is currently one of the mostly occured hereditary causes of thrombosis. It's examination is one of the mostly required among the thrombophilic mutations. Thrombophilic conditions are serious health complications when most oftenly deep venous trombosis occurs, which means formation of blood clot in deep vein system of legs. This condition may cause health complications especialy during gravidity, but it may have serious consequences even for healthy person. If examination for Factor V Leiden is recommended by medical specialist then it is paid from the health insurance otherwise it is payed by person who requests the examination. Purpose of theoretical part of the thesis is to offer information about physiology of hemostasis and to understand mechanism of this system, further is about hereditary of Factor V Leiden and associated hazards and about rules of indication of genetic examination of this disorder. There is also description of risks related with use of hormonal anticonception and formation of thrombophilic conditions. And lastly this thesis concernes about various genetical methods which are useable for detection of factor V Leiden. Practical part consists of procedures of genetical methods and obtained results. Used methods were RFLP-PCR, real-time PCR and reverse hybridization on the stripes. Part of the results is statistical processing of different concentrations of DNA obtained by isolation from peripheral blood or from buccal swab and statistical overview of factor V Leiden identifications throughout the years in laboratories of company GENLABS s.r.o. Carriers of this mutation have increased risk of occurrence of thrombosis which can cause serious health conditions like pulmonary embolism or myocardial infarction. Indivinduals with such mutation can be heterozygotes aswell as homozygotes. Heterozygotes have five to ten times higher chance of mutation occurance then healthy person but homozygotes have this chance eighty to one hundred times higher. In human population factor V Leiden is spread unequally. In white population is estimated occurrence around 15% on the other hand occurrence on humans with African or Asian descent is very rare.

Kľúčové slová

hemostáza, hemokoagulace, Leidenská mutace, genetické testování

Jazyk práce: Czech

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 3. 5. 2017

Obhajoba závěrečné práce

• Vedúci: Mgr. Dagmar Bystřická, Ph.D.

UNIVERSITY OF SOUTH BOHEMIA IN ČESKÉ BUDĚJOVICE

Faculty of Health and Social Studies

Bachelor programme / odbor:
Specialization in Health Service / Zdravotní laborant