Vliv klinicky využívaných psychofarmak, benzodiazepinů, na transkripční aktivitu xenoreceptorů v lidských nádorových liniích

Katerina Kubesova

Diplomová práce

The effect of clinically used benzodiazepines on transcritional activity of xenoreceptors in human cancer cell lines

Anotace:

Benzodiazepiny jsou široce využívány ve farmakoterapii pro své anxiolytické, myorelaxační, hypnotické, amnestické a antikonvulzivní vlastnosti. Nicméně, některé z nich u lidí způsobují poškození jater. Je zajímavé, že tyto látky nebyly testovány na schopnost indukovat cytochrom P450 a to i přes to, že jsou v praxi využívány přes 50 let. Cílem této diplomové práce bylo studium schopnosti indukovat CYP1A2 a CYP3A4 v primární kultuře lidských hepatocytů u Alprazolamu, Bromazepamu, Chlordiazepoxidu, Clonazepamu, Diazepamu, Lorazepamu, Medazepamu, Midazolamu, Nitrazepamu, Oxazepamu, Tetrazepamu a Triazolamu. Uvedené benzodiazepiny byly testovány v terapeutických koncentracích a v koncentracích odpovídajících plazmatickým hladinám u intoxikovaných pacientů. Byla nalezena slabá, ale významná indukce CYP3A4 u Midazolamu a Medazepamu. Ostatní benzodiazepiny neindukovaly expresi CYP3A4. Žádná z testovaných sloučenin neindukovala CYP1A2 a to ani v jedné ze třech nezávislých kultur lidských hepatocytů. Kromě toho, bylo pomocí metodiky Gene Reporter Assay zjištěno, že testované benzodiazepiny neaktivovaly aryluhlovodíkový receptor (AhR). Tato metodika byla prováděna pomocí transfekce hepatokarcinomové linie buněk. Výsledkem je zjištění, že Alprazolam, Bromazepam, Chlordiazepoxid, Clonazepam, Diazepam, Lorazepam, Nitrazepam, Oxazepam, Tetrazepam a Triazolam mohou být považovány za bezpečné léky na základě jejich neschopnosti indukovat enzymy CYP1A2 a CYP3A4. Slabá schopnost Medazepamu a Midazolamu mírně indukovat CYP3A4 v lidských hepatocytech může představovat zdroj mezilékových interakcí u pacientů léčených těmito látkami

Abstract:

Benzodiazepines have wide-spread used in pharmacotherapy for their anxiolytic, myorelaxant, hypnotic, amnesic and anticonvulsive properties. However, some of them induce liver injury in humans. Despite benzodiazepines are used in clinics over 50 years, they have not been surprisingly tested for capability to induce major drug-metabolizing cytochromes P450. In the current study, I have examined the potency of Alprazolam, Bromazepam, Chlordiazepoxide, Clonazepam, Diazepam, Lorazepam, Medazepam, Midazolam, Nitrazepam, Oxazepam, Tetrazepam and Triazolam to induce CYP1A2 and CYP3A4 in primary cultures of human hepatocytes. Benzodiazepines were tested in therapeutic concentrations and in concentrations corresponding to their plasma levels in intoxicated patients. It was found weak but significant induction of CYP3A4 mRNA by Midazolam and Medazepam, while other benzodiazepines did not induce CYP3A4 expression. None of the tested compounds induced CYP1A2 mRNA in three independent human hepatocytes cultures. In addition, employing Gene Reporter Assays with transiently transfected hepatocarcinoma cells, it was found that tested benzodiezpines did not activate aryl hydrocarbon receptor (AhR). In conclusion, Alprazolam, Bromazepam, Chlordiazepoxide, Clonazepam, Diazepam, Lorazepam, Nitrazepam, Oxazepam, Tetrazepam, Triazolam can be considered as safe drugs in term of their inability to induce cytochrome P450 enzymes CYP1A2 and CYP3A4. A weak potency of Medazepam and Midazolam to induce CYP3A4 mRNA in human hepatocytes may represent a source of drug-drug interactions in patients treated with these compounds

Klíčová slova

Lidské hepatocyty, cytochrom P450, benzodiazepiny, indukce enzymů

Keywords

Human hepatocytes, Cytochrome P450, Benzodizepines, Enzyme induction

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 23. 4. 2010

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 20. 5. 2010
• Vedoucí: Radim Vrzal
• Oponent: Petr Galuszka

Univerzita Palackého

Přírodovědecká fakulta

Magisterský studijní program / obor:
Biochemie / Biochemie