Mykobakteriální glykosyltransferasy

Bc. Gita Jančaříková

Master's thesis

Mycobacterial glycosyltransferases

Abstract:

Teoretická část této práce je tvořena třemi oddíly. První je soustředěn na obecnou charakterizaci glykosyltransferas s následným zaměřením na mykobakteriální glykosyltransferasy, konkrétně pak na galaktofuranosyltransferasu Rv3782. Druhý oddíl se věnuje komerčním klonovacím vektorům v souvislosti s vektorem pMTWL1 zkonstruovaným pro expresi problematických proteinů. Poslední část je věnována novému způsobu ligace – In-Fusion klonování. Praktická část diplomové práce byla věnována klonování, optimalizaci exprese a získání mykobakteriální galaktofuranosyltransferasy Rv3782 za využití nově vytvořeného plasmidu pMTWL1-Rv3782. Současně byl systém pMTWL1 otestován i na proteinu BclA.

Abstract:

Theoretical part of the diploma thesis contains three sections. First one is focused on general characterization of glycosyltransferases, further focused on glycosyltransferases from Mycobacterium tuberculosis, specifically galactofuranosyltransferase Rv3782. Second part describes commercial cloning vectors in connection with pMTWL1 vector – vector constructed in our laboratory for expression of problematic proteins. The last part takes notice of a new way of ligation – In-Fusion Cloning. Practical part of this work was devoted to optimization of expression and acquisition of mycobacterial galactofuranosyltransferase Rv3782 with use of a newly constructed pMTWL1 Rv3782 plasmid. Simultaneously, system pMTWL1 was tested on a protein BclA.

Keywords

mykobakteriální glykosyltransferasy, galaktofuranosyltransferasa Rv3782, klonovací vektory, In-Fusion klonování

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 30. 4. 2010

Thesis defence

• Date of defence: 7. 6. 2010
• Supervisor: prof. RNDr. Michaela Wimmerová, Ph.D.

Masaryk University

Faculty of Science

Master programme / field:
Biochemistry / Analytical Biochemistry