Laboratorní vyšetřování fagocytózy chemiluminiscencí

Bc. Hana Vaculíková

Bachelor's thesis

Laboratory investigation of phagocytosis by chemiluminescence

Abstract:

Profesionální fagocyty patří k základním strukturálním a funkčním složkám imunitního sytému a proto musí být vyšetření fagocytózy součástí spektra metod klinické laboratorní imunologie. Chemiluminiscence je metodou, která díky svému širokému uplatnění budí pozornost nejen klinické, ale také experimentální imunologie. Její samotný princip je založen na skutečnosti, že fagocyty reagují na různé podněty membrány (např. při fagocytóze) tzv. respiračním vzplanutím, které je spojeno se vznikem peroxidu vodíku, superoxidových radikálů a singletového kyslíku. Biologicky aktivní kyslíkové produkty reagují s excitabilními substráty v buňce a přitom dochází k uvolňování světelných kvant. K amplifikaci přirozené chemiluminiscence se používají tzv.luminofory, nejčastěji luminol. Excitované světlo se deteguje chemiluminometricky. Cílem této práce bylo popsat chemiluminiscenční test s plnou krví a dále zpracovat výsledky vlivu lokálně podávaných antibiotik (polymyxin B, colistin) na chemiluminiscenční aktivitu lidských leukocytů krve v podmínkách in vitro.

Abstract:

Professional phagocytes are among the basic structural and functional components of the immunity system. For this reason phagocytosis testing is necessarily to be a part of the methods of clinical laboratory immunology. Due to a wide range of use, chemiluminescence is a method which attracts attention not only of clinical but also of experimental immunology. Its very principle is based on the fact that phagocytes react on various stimuli of their membranes (e.g. when phagocytosing) by respiratory inflammation, during which hydrogen peroxide, superoxide radicals and singlet oxygen are produced. As biologically active products of oxygen react with excitable substrates in cell, quanta of light are emitted. To amplify natural chemiluminescence it is possible to use luminophores, mainly luminol. Excited light can be detected luminoletrically. The aim of this thesis was to describe a chemoluminescence test with a full blood sample and further to analyse the consequences of the influence which locally administered antibiotics have on chemoluminescent activity of human blood leukocytes under in vitro conditions.

Keywords

fagocytóza, respirační vzplanutí, chemiluminiscence, polymyxin, colistin

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 14. 5. 2009

Thesis defence

• Date of defence: 19. 6. 2009
• Supervisor: prof. MUDr. Jindřich Lokaj, CSc.
• Reader: prof. MUDr. Jiří Litzman, CSc.

Masaryk University

Faculty of Medicine

Bachelor programme / field:
Specializations in Health Science / Laboratory Assistant