Předtransfuzní vyšetření - zkouška slučitelnosti erytrocytárních transfuzních přípravků na Transfuzním oddělení Nemocnice České Budějovice, a. s.

Lucie TESAŘOVÁ

Bachelor's thesis

Pretransfusion measures - compatibility testing before transfusion of red cell product in Blood establishment and blood bank of Nemocnice České Budějovice, a. s.

Abstract:

Krev je tělní tekutinou, kterou se zatím přes veškerý pokrok nepodařilo nahradit žádnými jinými umělými přípravky. První zmínky o transfuzi nacházíme již u starých Egypťanů, Asyřanů, Židů i Římanů. První historicky zaznamenaný pokus o krevní transfuzi popsal historik a právník Stephano Infessura roku 1492. Na území našeho státu byla vykonána první známá transfuze krve teprve v 19. století. Provedl ji pražský lékař Antonín Erpek roku 1879. Předtransfuzní vyšetření je soubor imunohematologických vyšetření prováděných před podáním transfuze krve pacientovi. Cílem předtransfuzního vyšetření je zajistit příjemci účinnou substituci, při které budou transfundované erytrocyty dostatečně dlouho přežívat v jeho krevním oběhu a nedojde k jejich destrukci. Základním principem všech předtransfuzních vyšetření je laboratorní potvrzení, že je krev příjemce slučitelná s krví dárce. Komplex předtransfuzních vyšetření před podáním erytrocytárního transfuzního přípravku povinně zahrnuje vyšetření krevní skupiny příjemce, screeningu antierytrocytárních protilátek příjemce, popř. doplněného identifikací protilátek, a vlastní zkoušky kompatibility transfuzního přípravku. Všechna tato vyšetření se provádějí aglutinačními metodami. Zkouška kompatibility je reakce séra/plazmy pacienta s erytrocyty dárce, která slouží k potvrzení, že je krev příjemce slučitelná s krví dárce. Může být vyšetřena buď serologicky (na sklíčku, ve zkumavce, sloupcovou gelovou aglutinací, metodami pevné fáze) nebo elektronicky (strategie type and screen, elektronická zkouška kompatibility). Platnost zkoušky kompatibility je 72 hod., počítáno od doby odběru vzorku příjemce krevní transfuze. Moje práce se zabývá vyšetřením vlastní zkoušky kompatibility transfuzního přípravku, literárním porovnáním jednotlivých metod a porovnáním provedení metody sloupcové gelové aglutinace (LISS/NAT) manuálně a na automatu Techno TwinStation, včetně porovnání provozně-ekonomického hlediska. Praktická část této práce byla zpracována na Transfuzním oddělení Nemocnice České Budějovice, a. s. Literárním porovnáním metod zkoušky kompatibility jsem dospěla k závěru, že nejcitlivější metodou používanou k vyšetření zkoušky kompatibility, je nepřímý antiglobulinový test (NAT) provedený sloupcovou gelovou aglutinací nebo metodami pevné fáze. Moje zjištění odpovídá Doporučení Společnosti pro transfuzní lékařství ČLS JEP. Výsledky této bakalářské práce potvrzují správnost volby vedení TRS provádět vyšetření zkoušky kompatibility metodou sloupcové gelové aglutinace (LISS/NAT). Výhody sloupcové gelové aglutinace oproti zkumavkovým metodám spočívají v tom, že se jedná o rychlou metodu, s menší spotřebou reagencií i vzorku, s možností standardizace, automatizace, dokumentace. V neposlední řadě metoda vykazuje vyšší citlivost, což zvyšuje bezpečnost krevní transfuze pro pacienta. Vyšetření zkoušky kompatibility metodou sloupcové gelové aglutinace (LISS/NAT) bylo provedeno manuálně a na automatu Techno TwinStation u 52 vzorků pacientů, celkem 118 testů. Výsledky vyšetření byly shodné bez ohledu na zvolený způsob provedení. Ani z provozně-ekonomického hlediska se oba typy provedení tohoto vyšetření výrazněji neliší (manuální cca 24 Kč, automatizované cca 26 Kč). Při manuálním provedení nelze vyloučit chyby lidského faktoru, které jsou v případě automatizace eliminovány. Další výhodou automatu je dohledatelnost všech prvků zapojených do analytického procesu, které jsou archivovány a zůstanou přístupné po provedení testu. Výhodou manuálního provedení zkoušky slučitelnosti je kratší celkový čas vyšetření (cca 30 ? 35 min) oproti automatizovanému (

Abstract:

cca 45 ? 60 min dle počtu vzorků). Nevýhodou automatizovaného provedení zkoušky kompatibility na automatu Techno TwinStation je to, že není možné v průběhu pipetování přidávat další vzorky.

Abstract:

Blood is a body fluid which,despite all the scientific progress,still cannot be replaced by any other artificial product.The first records of transfusion were found in the ancient Egyptian,Assyrian,Jewish and Roman societies.The first historically recorded attempt at blood transfusion was described by a historian and lawyer Stephano Infessura 1492.The first known blood transfusion in the Czech Republic was performed in 1879 by Prague physician Anthony Erpek.Pretransfusion testing is a set of immunohematology examination performed prior to blood transfusion to the patient,which aims to ensure effective substitution for the patient,during which the transfused RBCs will survive long enough in recipient?s bloodstream and will not be destroyed.The basic principle of the whole pre-transfusion testing is laboratory confirmation that the recipient?s blood is compatible with the donor?s blood.The complex of pretransfusion testing before administration of RBCs includes methods of mandatory testing of the recipient?s blood group,antibody screening,possibly identification of special antibodies,and the cross match test itself.All these tests are performed using the agglutination method.Compatibility test is a reaction between donor?s and recipient?s serum,which is used for confirmation that the recipient?s blood is compatible with the donor?s blood.It can be examined either serologically(on a slide,in a tube,by gel column agglutination,by methods of solid phase)or electronically(type and screen strategy,electronic test of compatibility).Validity of the compatibility test is 72hours,counting from the moment of sampling of recipient?s blood.My thesis deals with the examination of the actual test of the compatibility of the transfusion product,literary comparison of various methods and comparison of the manual performance of the column gel agglutination method(LISS/NAT)and performance with the use of the Techno TwinStation machine.My work also includes comparison of an operational perspective and an economic perspective.The practical part of this work was carried out in Blood bank of Hospital Budweis.With the use of literary comparison of methods of compatibility test,I conclude that the most sensitive method used to investigate the compatibility test is the indirect anti-globulin test(NAT)performed using column gel agglutination or solid phase methods.My recommendation corresponds to the findings of Společnost pro transfuzní lékařství.The thesis confirms that the cross match testing via using the gel column agglutination method(LISS/NAT)was the best choice made by the Blood bank.Benefits of the gel column agglutination compared to the tube methods are the speed,smaller consumption of reagents and blood samples,the possibility of standardization,automation and documentation.Finally,the method has higher sensitivity,which increases the safety of blood transfusion for the patient.Examination of compatibility testing using the gel column agglutination method(LISS/NAT)was done in 52 patients manually and using the Techno TwinStation(a total of 118 tests).Examination results were identical regardless the chosen method.There was also no significant difference concerning the operational and economic costs of the two methods(manual was about 24CZK,automated was about 26CZK).In manual performance human errors cannot be eliminated, whereas in automation these errors are eliminated.Another advantage of automation is the traceability of all the elements involved in the analytical process,which are archived and will remain accessible after the test.The advantage of the manual compatibility tests is shorter total examination time(about 30-35min compared to about 45-60min when using automated method;depending on the number of samples).The disadvantage of automated method of compatibility testing using the Techno TwinStation machine is the impossibility to add more samples during pipetting.

Keywords

imunohematologie, předtransfuzní vyšetření, sloupcová gelová aglutinace, transfuze, zkouška kompatibility

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 3. 5. 2013

Accessible from:: 3. 5. 2013

Thesis defence

• Supervisor: MUDr. Petr Biederman

UNIVERSITY OF SOUTH BOHEMIA IN ČESKÉ BUDĚJOVICE

Faculty of Health and Social Studies

Bachelor programme / field:
Specialization in Health Service / Zdravotní laborant