Orchideoidní mykorhizní houby - izolace a in vitro kultivace

Mgr. Bc. Zuzana Krausová

Bachelor's thesis

Orchid mycorrhizal fungi - isolation and in vitro cultivation

Abstract:

Izolace orchideoidních mykorhizních (OM) hub je nezbytným krokem jejich studia v in vitro systémech, např. při sledování účinku fungicidů na potlačení jejich růstu či při jejich využití v symbiotických in vitro výsevech orchidejí. Izolace je rovněž vhodným krokem, který usnadňuje molekulárně-biologickou identifikaci symbiontů jednotlivých druhů orchidejí. Ve své práci jsem se zaměřila na izolaci OM hub ze tří druhů orchidejí, Ophrys sicula, Ophrys speculum a Anacamptis pyramidalis. Izolace byla úspěšná pouze v případě prvního druhu (izolát označen jako 2010/1). V případě A. pyramidalis se izolace nezdařila pravděpodobně z důvodu absence intaktních pelotonů v jejich kořenech – přestože kolonizace byla vysoká, v daném období zcela převládaly kolabované pelotony. V druhé části své práce jsem testovala vliv fungicidu benomylu, který bývá doporučován k omezení růstu kontaminujících askomycet při izolacích, na růst dvou izolátů OM hub, 2006/7 a 2010/1. Benomyl v obou testovaných koncentracích, 1 nebo 10 mg•l-1, výrazným způsobem snižoval růst mycelia obou izolátů na PDA médiu v Petriho miskách a jeho použití tedy nelze pro izolace OM hub obecně doporučit.

Abstract:

Isolation of orchid mycorrhizal (OM) fungi is prerequisite for their study using in vitro systems, e.g. for quantification of inhibitory effects of fungicides on their growth or for symbiotic orchid seeds sowing. It is also suitable step facilitating molecular-biological identification of orchid symbionts. In my work I isolated OM fungi from three orchid species, Ophrys sicula, Ophrys speculum, and Anacamptis pyramidalis, however, I was successful only in the case of the last species (isolate 2010/1). Isolation from the roots of A. pyramidalis was unsuccessful due to absence of intact pelotons – despite the overall colonization was high, the collapsed pelotons dominated at this time. In the second part of my work I tested the effects of the fungicide benomyl on the growth of two isolates of OM fungi – 2006/7 and 2010/1. This fungicide is sometimes recommended for OM fungi isolation as it should eliminate contaminating ascomycetes, while the OM fungi should be less sensitive. In both concentrations tested, 1 or 10 mg•l-1, benomyl reduced the growth of mycelia on PDA medium in Petri dishes substantially and it is thus not possible to recommend its usage for OM fungi isolation.

Keywords

Ophrys sicula, Ophrys speculum, Anacamptis pyramidalis, benomyl, izolace, isolation, houby, fungi, orchideoidní mykorhiza, orchid mycorrhiza

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 27. 5. 2010

Thesis defence

• Date of defence: 22. 6. 2010
• Supervisor: RNDr. Milan Baláž, Ph.D.

Masaryk University

Faculty of Science

Bachelor programme / field:
Biology / Biology with a view to Education