Zavedení fluorescenční metody pro stanovení meziřetězcových můstků v DNA

Monika TRTÍKOVÁ

Bakalářská práce

Implementation of fluorescence-based method for determination of DNA interstrand cross-links.

Anotace:

Řada bifunkčních nízkomolekulárních látek, interagujících s DNA, je schopna tvořit v DNA kovalentní meziřetězcové můstky. Mezi tyto látky patří jak klinicky používaná a nově navržená protinádorová léčiva, tak i mnoho látek s prokázanou mutagenní nebo karcinogenní aktivitou. Meziřetězcové můstky představují vážné poškození DNA, protože silně blokují důležité biologické procesy jako replikace nebo transkripce a jsou obtížně buňkou opravovány. Cílem bakalářské práce bylo zavést metodu pro stanovení vzniku meziřetězcových můstků a jejich kvantifikaci, založenou na měření fluorescence. Pomocí této metody bylo stanoveno množství meziřetězcových můstků v DNA po její reakci s cisplatinou. Získané výsledky byly porovnány s údaji publikovanými v literatuře a ukázaly, že tato nová metoda může při použití vhodné DNA plnohodnotně nahradit dosud používané metody využívající radioaktivní značení.

Abstract:

Many bifunctional low-molecular substances interacting with DNA are capable of forming covalent interstrand cross-links in DNA. These substances include clinically used and newly designed anticancer drugs, as well as many substances with a proven mutagenic or carcinogenic activity. The interstrand cross-links cause serious DNA damage because they strongly block important biological processes such as replication or transcription and they are difficult to repair by the cell. The aim of this bachelor thesis was to introduce a method for determination of interstand DNA cross-links and their quantification based on fluorescence measurements. Using this method, the amount of interstrand cross-links in DNA was determined after its reaction with antitumor cisplatin. The obtained results were compared with the data published in the literature and showed that this new method, using appropriate DNA, can fully substitute the previously used methods employing radioactive labeling.

Klíčová slova

Cisplatina, meziřetězcové můstky, metody detekce

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 6. 5. 2019

Obhajoba závěrečné práce

• Vedoucí: prof. RNDr. Viktor Brabec, DrSc.

UNIVERZITA PALACKÉHO V OLOMOUCI

Přírodovědecká fakulta

Bakalářský studijní program / obor:
Biochemie / Biotechnologie a genové inženýrství