Antioxidačné funkcie včelieho vitellogenínu

Eva HRTÁNKOVÁ

Bachelor's thesis

Antoxidant functions of honey bee vitellogenin

Anotácia:

Táto bakalárska práca sa zaoberá štúdiom proteínu vitellogenínu so zameraním na jeho pôsobenie v organizme včely medonosnej (Apis mellifera). Vitellogenín podľa doterajších poznatkov zohráva významnú úlohu v regulácii dlhovekosti, sociálnom usporiadaní, imunitných reakciách a antioxidačnej ochrane včiel. Teoretická časť práce predstavuje súhrn informácií o štruktúre a vlastnostiach vitellogenínu. V literárnej rešerši sú ďalej zhrnuté dopady pôsobenia oxidačného stresu na živé organizmy a krátky prehľad metód využívaných na testovanie antioxidačných vlastností proteínov a nízkomolekulárnych látok. V experimentálnej časti bola optimalizovaná detekcia vitellogenínu z včelej hemolymfy metódou Western blot. Najlepšie výsledky boli dosiahnuté v usporiadaní Semi-dry blot s využitím nitrocellulosovej membrány a polovičným riedením primárnej protilátky oproti pôvodnému protokolu. Následne prebiehalo testovanie antioxidačných vlastností vitellogenínu pomocou detekcie nitrovaných a karbonylovaných proteínov. Bolo dokázané, že včelí vitellogenín a hexameríny podliehajú nitrácii, čo môže byť pokladané za kľúčové zistenie pre ďalší výskum v súvislosti s antioxidačnými vlastnosťami vitellogenínu. Prítomnosť karbonylovaných proteínov sa nepodarilo preukázať ani v hemolymfe, ani na vzorovom hovädzom sérovom albumíne.

Abstract:

This bachelor thesis deals with the study of vitellogenin protein with a focus on its action in the honey bee (Apis mellifera). Vitellogenin, according to previous knowledge, plays an important role in the regulation of longevity, social organization, immune responses and antioxidant protection in honey bees. The theoretical part of this thesis presents a summary of information on the structure and properties of vitellogenin. Further, it summarizes the effects of oxidative stress on living organisms and a brief review of methods used to test the antioxidant properties of proteins and low molecular weight substances. In the experimental part, the detection of vitellogenin from honey bee haemolymph by Western blot was optimised. The best results were obtained in a Semi-dry blot arrangement using nitrocellulose membrane and half dilution of the primary antibody compared to the original protocol. Subsequently, the antioxidant properties of vitellogenin were tested by detecting nitrated and carbonylated proteins. Honey bee vitellogenin and hexamerins were shown to undergo nitration, which can be considered as a key finding for further research regarding the antioxidant properties of vitellogenin. The presence of carbonylated proteins could not be demonstrated either in haemolymph or on the model bovine serum albumin.

Kľúčové slová

vitellogenin, proteíny, včela medonosná, antioxidant, oxidačný stres, dlhovekosť, imunita

Jazyk práce: Czech

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 10. 5. 2022

Obhajoba závěrečné práce

• Vedúci: prof. Mgr. Marek Petřivalský, Dr.

Palacký University Olomouc

Faculty of Science

Bachelor programme / odbor:
Biochemistry / Biochemistry