Charakterizace serologické odpovědi hospodářských zvířat proti infekci salmonelami

Bc. Zuzana Sekelová

Diplomová práce

The serological response of livestock to Salmonella infection

Abstract:

Diseases caused by Salmonella are problem worldwide. The most common source of Salmonella infection is food of animal origin. In recent years vaccination of livestock has significantly reduced the incidence of salmonellosis. However, existing vaccines do not meet high standards of modern vaccines and are not able to develop further. The thesis focuses on the characterization of the serological response of livestock to Salmonella infection. Proteins isolated from a strain of Salmonella Enteritidis 147 were separated by using the method of SDS-PAGE and transferred by Western blot method to membrane. Proteins were analyzed by immunodetection with sera obtained from chickens infected with strain Salmonella Enteritidis 147. Total protein was studied as well as various cell fractions (fraction enriched with secreted, membrane and periplasmic proteins). A protein was detected in the fractions enriched with membrane proteins. The protein reacted strongly with specific antibodies in serum obtained from chicken infected with strain Salmonella Enteritidis 147. The size of specifically reacting protein was approximately 39.5 kDa. This protein can be used for construction of new vaccine strains. The strain with deletion of the gene, which encodes this protein, might in practice allow the serological differentiation of the vaccinated animals from infected ones.

Abstract:

Ochorenia spôsobené baktériami rodu Salmonella sú celosvetovým problémom. Najčastejším zdrojom nákazy salmonelou sú potraviny živočíšneho pôvodu. Vakcinácia hospodárskych zvierat sa v posledných rokoch významne podiela na znížení výskytu salmonelóz. Avšak súčasné vakcíny nevyhovujú vysokým štandardom, ktoré musia moderné vakcíny splňovať, a neumožňujú ďalší vývoj. Táto diplomová práca sa zaoberá charakterizáciou sérologickej odpovede hospodárskych zvierat na infekciu baktériami Salmonella. Proteíny izolované z kmeňa Salmonella Enteritidis 147 boli separované na základe veľkosti pomocou metódy SDS-PAGE a prenesené pomocou Western blotu na membránu. Proteíny boli nasledovne analyzované imunodetekciou so sérami získanými z kuriat infikovaných kmeňom Salmonella Enteritidis 147. Študovaný bol celkový proteín ako aj rôzne bunkové frakcie (frakcia obohatená o secernované, periplazmatické a membránové proteíny). Vo frakcii obohatenej o membránové proteíny sa podarilo detekovať proteín, ktorý reagoval výrazne špecificky s protilátkami v sére získanom z kuraťa infikovaného kmeňom Salmonella Enteritidis 147. Veľkosť špecificky reagujúceho proteínu je približne 39,5 kDa. Tento špecificky rozpoznávaný proteín môže slúžiť ku konštrukcii nového vakcinačného kmeňu. Kmeň s deléciou génu, ktorý kóduje tento proteín, by mohol v praxi umožniť sérologické odlíšenie vakcinovaných zvierat od infikovaných.

Klíčová slova

Salmonella, patogenita, imunitný systém, vakcinácia, imunoreaktívne proteíny, pathogenicity, immune system, vaccination, immunoreactive proteins

Jazyk práce: slovenština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 11. 5. 2012

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 6. 6. 2012
• Vedoucí: doc. RNDr. Ivan Rychlík, Ph.D.

Masarykova univerzita

Přírodovědecká fakulta

Magisterský studijní program / obor:
Biochemie / Biochemie