Úloha lysinových zbytků v biologické aktivitě elicitinů

Bc. Adam Broskevič

Bachelor's thesis

The role of lysine residues in elicitins activity

Anotácia:

Elicitiny tvoří rodinu malých konzervovaných proteinů sekretovaných oomycetami Phytophthora a Pythium. Elicitiny jsou schopny spouštět obrannou reakci a indukovat rezistenci u mnoha rostliných druhů. Mezi zástupce elicitinu se řadí malý protein kryptogein (o velkosti 10 kDa), který je sekretovaný oomycetou Phytophthora cryptogea. V rámci této bakalářské práce byly exprimovány dvě mutantní formy kryptogeinu K48T/94T a K39T/94T. Tyto mutantní formy kryptogeinu nesou záměnu lysinových zbytků za threonin na pozicích 39, 48 a 94. Elicitiny K48T/94T a K39T/94T byly exprimovány v eukaryotním expresním systému Pichia pastoris. Dále byl zkoumán vliv těchto mutací na biologickou aktivitu. Proteiny byly aplikovány na listy rostlin tabáku a byla sledována nekróza a následně byly měřena akumulace transkriptů PR genů.

Abstract:

Elicitins are group of small conserved proteins secreted by oomycetes Phytophthora and Pythium. Elicitins can induce defense reaction and resistence in many plant species. Cryptogein is a small elicitin of molecular mass 10 kDa secreted by oomycete Phytophthora cryptogea. In this thesis two cryptogein mutants K48T/94T and K39T/94T were expressed using eukaryotic expression system Pichia pastoris. K39T/94T and K48T/94T carry substitution of lysine residua on positions 39, 48 and 94 for threonine. Role of this mutation in biological activiy was studied in this thesis. Proteins were applied on tobacco plants and necrosis of its cells was observed. After that accumulation of PR genes transcripts was measured.

Kľúčové slová

obranné reakce rostlin, elicitiny, kryptogein, mutantní formy kryptogeinu, Nicotiana tabacum, Pichia pastoris, plant defense reaction, elicitins, cryptogein, cryptogein mutants

Jazyk práce: Czech

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 16. 5. 2017

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 13. 6. 2017
• Vedúci: doc. Mgr. Jan Lochman, Ph.D.

Masaryk University

Faculty of Science

Bachelor programme / odbor:
Biochemistry / Biochemistry