Analýza variability povrchových antigenů patogenní bakterie Borrelia burgdorferi sensu lato

Mgr. Adam Norek, Ph.D.

Doctoral thesis

Surface proteins variability analysis of pathogenic bacterium Borrelia burgdorferi sensu lato

Anotácia:

Bakterie řazené do skupiny Borrelia burgdorferi sensu lato, jsou významnými patogeny, známé svojí vysokou variabilitou. Ta se projevuje nejen na úrovni životního cyklu, ale také na úrovni genetické a antigenní výbavy. V této práci jsme se zaměřili na vliv popisované heterogenity na úrovni hematofágních členovců a zastoupení genospecies či jednotlivých kmenů na lokální úrovní. Naše výsledky potvrdily přítomnost borrelií nejen v tkáních klíšťat, ale také larvách komárů (Culex), blech (Siphonaptera) a roztočů (Mesostigmata). Zároveň se nám podařilo identifikovat borrelie izolované z klíšťat sesbíraných na lokalitě Brno- Pisárky (B. afzelii, B. garinii) a tyto kmeny přiřadit ksedmi různým ospC fylogenetickým typům. V závěrečné části jsme se pak zaměřili na zhodnocení vlivu variability OspC proteinu z pohledu protilátkové odpovědi, kdy se nám podařilo identifikovat tři částečně konzervované epitopy ve variabilní oblasti, z nichž jeden (2D1) je zastoupen u více než 59 % porovnávaných OspC sekvencí.

Abstract:

Bacteria belonging to Borrelia burgdorferi sensu lato complex are well known as highly variable. This variability is pronounced not only in the life cycle but at the genetic and antigenic level too. In our work, we try to determine the influence of described diversity in haematophagous invertebrates as well as in genospecies prevalence. Our results confirmed the presence of B. burgdorferi s.l. not only in the tick tissues but mosquito larvae (Culex), flies (Siphonaptera) and mites (Mesostigmata) as well. Moreover, we have genotyped B. burgdorferi s.l. strains previously isolated at Brno-Pisárky locality (B. garinii, B. afzelii) and seven different ospC phylogenetic types were assigned. In the last part of we focus on the evaluation of OspC heterogenicity from the immunologic point of view, when we identified three partially conserved epitopes in the variable part of OspC with the 2D1 epitope present in more than 59 % of compared OspC amino acid sequences.

Kľúčové slová

Borrelia burgdorferi, klíště, komár, roztoč, blecha, PCR, flagellin, OspC, monoklonální protilátka, epitop

Jazyk práce: Czech

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 5. 1. 2017

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 27. 1. 2017
• Vedúci: doc. RNDr. Alena Žákovská, Ph.D.
• Oponent: MSc. Nataliia Rudenko, Ph.D., prof. MVDr. Branislav Peťko, CSc.

Masaryk University

Faculty of Science

Doctoral programme / odbor:
Biology (4-years) / Animal Physiology