Vliv kultivačních podmínek na tvorbu biofilmu u probiotických mikroorganizmů

Bc. Kateřina Peržinová

Diplomová práce

Impact of culture conditions on biofilm formation by probiotic microorganisms

Anotace:

V této práci byla pomocí Microtitre Plate Assay kvantitativně sledována tvorba biofilmu u devatenácti kmenů laktobacilů v různých kultivačních podmínkách. Množství vyprodukovaného biofilmu nejvíce ovlivnily výběr kultivačního média, teplota a délka inkubace, v menší míře pak složení atmosféry. Přídavek cysteinu se ukázal jako statisticky nevýznamný. Všeobecně kmeny tvořily více biofilmu v MRS médiu než v mTSB. Účinek doby inkubace silně souvisel s kultivační teplotou. Biofilm vznikal rychleji při 37ºC inkubaci než při 30 ºC, při kterých se také významněji uplatnila prodloužená kultivace. Typ atmosféry sám o sobě neovlivňoval množství biofilmu. Dvanáctitýdenní pasážování kmenů na pevném médiu snižovalo objem produkovaného biofilmu v závislosti na ostatních parametrech kultivace u většiny z testovaných kmenů. V několika případech však byla tvorba stimulována. Dynamika tvorby biofilmu sledovaná během čtyřdenní inkubace se lišila mezi všemi sedmi sledovanými kmeny. Ze zjištěných výsledků vyplývá, že optimální podmínky pro produkci biofilmu jsou individuální a je třeba je charakterizovat samostatně pro každý kmen nezávisle na druhu.

Abstract:

This thesis deals with biofilm cultivation of nineteen lactobacili strains under various conditions using the Microtitre Plate Assay. The quantity of biofilm was influenced primarily by cultivation medium, temperature and incubation period. The impact of atmosphere was less significant and supplementation of L-cystein exerted no effect on the biofilm formation at all. The strains produced more biofilm in MRS medium than in mTSB in general. The incubation period was related to the temperature. Biofilm developed faster in 37 ºC compared to 30 ºC where the formation was promoted by longer incubation. The type of atmosphere itself did not influence the detected amount of biofilm. The volume of biofilm also decreased by the majority of strains after twelve-week-long subculturing on solid medium. However, in a few cases, the formation of biofilm was also stimulated. The dynamics of biofilm development was observed within four days and differed greatly among all the seven strains tested. From the results can be conluded that optimal conditions for biofilm formation are individual and are to characterize separately for every strain independently from the species they belong to.

Klíčová slova

Biofilm, Probiotika, Laktobacily, Médium, Teplota, Atmosféra, Délka kultivace, Pasážování, Mikrotitrační destička, Probiotics, Laktobacilli, Temperature, Atmosphere, Cultivation period, Subculturing, Microtitre Plate

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 19. 9. 2014

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 6. 2. 2015
• Vedoucí: doc. MUDr. Filip Růžička, Ph.D.

Masarykova univerzita

Přírodovědecká fakulta

Magisterský studijní program / obor:
Experimentální biologie / Speciální biologie