Cytogenetický a expresní profil protoplastových kultur vzhledem k jejich regeneraci

Zuzana CRLÍKOVÁ

Bakalářská práce

Cytogenetic and expression profile of protoplast cultures in relation to their regeneration

Anotace:

Protoplastové kultury jsou vhodným prostředkem pro studium přestaveb chromatinu během přechodu buněk ze stavu terminálně diferenciovaného do stavu totipotentního nebo pluripotentního. V jádře protoplastových buněk dochází k dekondenzaci chromatinu a poté následuje rekondenzace, která umožňuje protoplastovým buňkám tvořit nové buněčné linie. Tato změna bývá spojena s programem dediferenciace buněk a změnou expresního profilu. Proces dekondenzace je v praktické části ilustrován dekondenzací satelitní repetice 1 v protoplastech 0 h po izolaci. Pro izolaci protoplastů jsou využívány enzymatické roztoky odbourávající buněčné stěny. Vedlejším účinkem enzymů je však vznik reaktivních oxidativních látek vyvolávajících stres. Tyto látky způsobují destrukci genetického materiálu a membránových organel. Rostiny využívájí obranný mechanismus - tzv. ?scavenging? systém, který přirozenou cestou eliminuje reaktivní oxidativní látky. Geny antioxidativního systému jsou spouštěny v různých časových úsecích během kultivace protoplastů. Praktická část práce je zaměřena na detekci exprese genů antioxidativního systému v protoplastech kultivovaných v časech 0, 24, 48 a 72 hodin. V závěru práce jsou diskutovány dosažené výsledky.

Abstract:

Protoplast cultures are appropriate material of the study of chomatin remodelation during their transformation from the finally diferenciated state to totipotent or pluripotent one. Decondensation of chromation takes place in nucleus of protoplast cells that is followed by recondensation, this cycle enables them to create new cell lines. This change is connected to program of dediferentiation of cells and change of expresinve profile. Process of decondensation is shown by decondensation of satelite repetition 1 in protoplast in 0 h after izolation in practical part of the task. Enzymatic solutins are used to obtain protoplasts thanks to degradation of the cell wall. However reactive oxigen species are side products of enzymes and they induce stress. These substances cause degradation of genetic material and membranous organells. Due to this fact plants evolved scavengering system which eliminates reactive oxigen species. Genes of antioxidizing system are turned on during cultivation of protoplasts in various time intervals. Expression of genes of antioxidizing system in protoplastas which were cultivated in 0, 24, 48 and 72 hours are described in practical part of the task.

Klíčová slova

protoplast, re- a dekondenzace, oxidativní stres, "scavenging" systém

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 2. 8. 2011

Zveřejnit od: 2. 8. 2011

Obhajoba závěrečné práce

• Vedoucí: Doc. RNDr. Vladan Ondřej, Ph.D.

UNIVERZITA PALACKÉHO V OLOMOUCI

Přírodovědecká fakulta

Bakalářský studijní program / obor:
Biologie / Molekulární a buněčná biologie