Stanovení kinetických parametrů acetylcholinesterázy

Bc. Veronika Folcová

Diplomová práce

Determination of kinetic parameters of acetylcholinesterase

Anotace:

Tématem této práce je stanovení kinetických parametrů acetylcholinesterázy. Teoretická část je věnována cholinesterázám. Zabývá se popisem jejich struktury, funkce a souvislostmi acetylcholinesterázy a butyrylcholinesterázy s Alzheimerovou chorobou. Velká část teoretické části je věnována popisu metod stanovení aktivity a inhibice cholinesteráz. V experimentální části se práce zabývá stanovením hodnot IC50 daných inhibitorů Ellmanovou metodou, pH-statovou metodou a pomocí elektrochemických senzorů technikou square wave voltametrie. Dále stanovením kinetických parametrů neinhibované rekce zmíněnými metodami a stanovením kinetických parametrů inhibované reakce a inhibičních konstant vybraných inhibitorů Ellmanovou metodou. Experimentální část je také věnována stanovení rozdělovacích koeficientů testovaných inhibitorů v soustavě 1-oktanol:voda.

Abstract:

This thesis is focused on the determination of kinetic parameters of acetylcholinesterase. In the theoretical part there are described cholinesterases, their structure, function and acetylcholinesterase and butyrylcholinestrase relationships with Alzheimer's disease. A large part of the theoretical part is devoted to the description of methods of activity and inhibition cholinesterases determination. In the experimental part there is described determination of IC50 values of given inhibitors by Ellman´s method, pH-stat method and electrochemical sensors using square wave voltammetry technique. Furthermore, there is described determination of kinetic parameters of uninhibited reaction by mentioned methods and there is described determination of kinetic parameters of inhibited reaction and inhibitory constants of selected inhibitors by the Ellman´s method too. The experimental part is also devoted to the determination of the partition coefficients of the tested inhibitors in the 1-octanol:water system.

Klíčová slova

acetylcholinesteráza, butyrylcholinesteráza, Alzheimerova choroba, metody stanovení, Ellmanova metoda, pH-stat, elektrochemický senzor

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 3. 5. 2018

Zveřejnit od: 31. 12. 2999

Obhajoba závěrečné práce

• Vedoucí: Mgr. Katarína Vorčáková, Ph.D.

Univerzita Pardubice

Fakulta chemicko-technologická

Magisterský studijní program / obor:
Speciální chemicko-biologické obory / Bioanalytik