Optimalizace detekce enzymu myeloperoxidasy v lidské plasmě metodou ELISA

Mgr. Jana Navrátilová, Ph.D.

Bakalářská práce

Optimization of ELISA determination of myeloperoxidase in human plasma

Anotace:

Cílem této bakalářské práce bylo optimalizovat detekci enzymu myeloperoxidasy z lidské plasmy pomocí metody ELISA. Experimentálně byly testovány vybrané složky ELISA metody. Nejprve byl určen vhodný typ „capture antibody“, dále byly stanoveny optimální koncentrace všech dalších použitých protilátek a současně bylo nalezeno vhodné ředění vzorků. Získaná data prokázala dobrou citlivost této metody pro detekci myeloperoxidasy ve vzorcích lidské plasmy při použití optimalizovaného postupu. Výsledná zoptimalizovaná metoda byly použita při měření koncentrace myeloperoxidasy v plasmě pacientů s chronickou pankreatitidou. Bylo zjištěno, že koncentrace myeloperoxidasy byla u těchto pacientů vyšší ve srovnání se zdravými kontrolními jedinci, avšak rozdíl nebyl statisticky významný. Myeloperoxidasa tedy není vhodným ukazatelem charakterizujícím pacienty s chronickou pankreatitidou a nemá tedy u těchto pacientů diagnostický význam. Celkově lze však shrnout, že zoptimalizovaná ELISA metoda pro detekci myeloperoxidázy v lidské plasmě je dostatečně citlivá a vhodná pro stanovení myeloperoxidázy v klinických studiích.

Abstract:

The aim of this study was to optimalize a detection of myeloperoxidase in human plasma samples using ELISA. Selected components of the ELISA reaction were tested. Optimal type of capture antibody and specific concentrations of all used antibodies as well as specific sample dilution were defined based on obtained data.. Experimental data proved good sensitivity of this method using new protocol and suggested possible application of this method for assessment of myeloperoxidase in human plasma. The optimised ELISA method was employed to measure myeloperoxidase in plasma samples from patients with chronic pancreatitis. The concentration of myeloperoxidase tended to be higher in patients compared to healthy control group but this difference was not statistically significant. Thus, myeloperixodase is not a suitable marker to characterize patients with chronic pancreatitis and does not have any diagnostic potential in these patients. Overall it could be concluded that newly developed ELISA fro detection of myeloperoxidase in human plasma is sufficiently sensitive and suitable for determination of myeloperoxidase in clinical trials.

Klíčová slova

myeloperoxidasa, ELISA, protilátka, antigen, plasma, chronická pankreatitida, myeloperoxidase, antibody, chronic pancreatitis

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 13. 5. 2010

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 14. 6. 2010
• Vedoucí: doc. Mgr. Lukáš Kubala, Ph.D.

Masarykova univerzita

Přírodovědecká fakulta

Bakalářský studijní program / obor:
Biochemie / Biochemie