Stanovení CDT metodou kapilární zónové elektroforézy

Kristýna BUREŠOVÁ

Bachelor's thesis

Determination of CDT by capillary zone electrophoresis method.

Abstract:

Abusus alkoholu patří v rozvinutých zemích k velmi závažným celospolečenským problémům s mnoha sociálními a ekonomickými dopady. Diagnostikovat chronický abusus alkoholu může být v mnoha případech velmi komplikované a základem je dobrá spolupráce klinického lékaře a laboratorního pracoviště. Rutinní diagnostika chronického abusu alkoholu je v dnešní době založena na vyšetření GGT, MCV a poměru AST/ALT. Jako marker s nejvyšší diagnostickou validitou se dnes považuje karbohydrát deficientní transferin (CDT). Molekula transferinu se skládá ze dvou polysacharidových řetězců, kde na každém mohou být navázány až čtyři zbytky kyseliny sialové (tzv.sializace). Tato sializace však může být již po dvoutýdenním zvýšeném příjmu alkoholu výrazně snížena. Detekce těchto méně sializovaných molekul transferinu, označovaných jako CDT, může být využita v diagnostice chronického abusu alkoholu. Literární údaje o diagnostické validitě CDT jsou však vysoce variabilní. CDT má odlišnou validitu u žen a u mužů, nejvyšší diagnostické validity dosahujeme právě jeho stanovením v kombinaci s ostatními markery. Experimentální část byla provedena na přístroji MINICAP, který pracuje na principu kapilární zónové elektroforézy. Měření bylo provedeno z kontrolních materiálů a ze směsného séra pacientů. Z naměřených hodnot byly poté vypočítány potřebné statistické veličiny, jako je aritmetický průměr, směrodatná odchylka a variační koeficient. Na základě výpočtů byla poté provedena a zhodnocena validace metody na přístroji MINICAP pro stanovení CDT.

Abstract:

Alcohol abuse is part of very serious social problems with many social and economic impacts in developed countries. Chronical alcohol abuse may be in many cases very complicated to diagnose and good cooperation between clinician and laboratory workspace is fundamental. Routine diagnosis of chronic alcohol abuse is nowadays based on GGT and MCV determination and AST/ALT ratio. Recently, as a marker with the highest diagnostic validity is considered Carbohydrate Deficient Transferrin (CDT). The transferrin molecule consists of two polysaccharide chains where on each chain could be attached up to four sialic acids (so-calledsialization). However, sializationmay be after two weeks of increased alcohol intake significantly reduced. Detection of these less sialized transferrin molecules, known as CDTs, can be used to diagnose chronic alcohol abuse. Unfortunately, informations from literature about the diagnostic validity of CDT are highly variable. CDT validation differs among women and men and the highest diagnostic validity is achieved during determination in combination with other markers. The experimental part was done on the MINICAP instrument, which works based on the principle of capillary zone electrophoresis. Measurements of control materials and mixed serum patients were performed. From measured values, the necessary statistical values were calculated, such as arithmetic mean, standard deviation and coefficient of variation. Based on the calculations, the validation of the method on the MINICAP instrument was then performed and evaluated for CDT determination.

Keywords

Alkoholová hepatopatie, karbohydrát deficientní transferin, kapilární zónová elektroforéza, elektroforetické metody, validace.

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 3. 5. 2019

Thesis defence

• Supervisor: MUDr. Tomáš Franěk, Ph.D.

UNIVERSITY OF SOUTH BOHEMIA IN ČESKÉ BUDĚJOVICE

Faculty of Health and Social Sciences

Bachelor programme / field:
Specialization in Health Service / Zdravotní laborant