Laboratorní možnosti vyšetření aktivace T-lymfocytů

Mgr. Tereza Dědová

Bachelor's thesis

Options in laboratory measurement of T lymphocyte activation

Anotácia:

Proliferační testy lymfocytů se řadí mezi specializovaná funkční vyšetření prováděná v imunologické laboratoři. Sledování inkorporace radioaktivně značeného thymidinu do DNA proliferujících buněk patří z důvodu citlivosti již několik desítek let mezi takzvaný „zlatý standard“ v této oblasti imunologických vyšetření. Ačkoli následně byly představeny další metody pracující na odlišných principech, žádná z nich nebyla plošně prosazena do klinických laboratoří, neboť nebyla dostatečně citlivá. Teprve před několika lety začala být ve větší míře využívána průtoková cytometrie ke stanovení proliferační aktivity buněk. Tato neradioaktivní metoda vyhodnocuje ředění fluorescenčního barviva v cytoplazmě dceřiných buněk. Výhodou průtokové cytometrie je také možnost sledování počtu buněčných dělení a životaschopnosti buněk. K dispozici jsou nyní již i komerční soupravy s aplikací uvedeného principu.

Abstract:

Lymphocyte proliferation assays are specialized tests performed in clinical immunological laboratories. Incorporation of radioactively labeled thymidine into DNA of proliferating cells has been considered to be “the golden standard” for several decades. This opinion remains due to the fact that several other methods has been introduced since then. Unfortunately none of them was sensitive enough to replace thymidine incorporation. Recently flow cytometry started to be used to measure cell proliferation activity. Non-radioactive fluorescent dye is applied to determine number of cell division and cell viability. Commercial sets using this principle are now available. This work compares incorporation techniques and new method which uses fluorescent dye.

Kľúčové slová

Proliferační test, T-lymfocyt, průtoková cytometrie, inkorporace tymidinu, CFSE

Jazyk práce: Czech

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 2. 5. 2012

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 12. 6. 2012
• Vedúci: prof. MUDr. Vojtěch Thon, Ph.D.
• Oponent: prof. MUDr. Jiří Litzman, CSc.

Masaryk University

Faculty of Medicine

Bachelor programme / odbor:
Specializations in Health Science / Laboratory Assistant