Využití kolonové gelové elektroforézy pro on-line spojenís ICP-MS v metaloproteomice

Bc. Petr Rašovský

Master's thesis

Utilisation of column gel eletrophoresis for on-line connection to ICP-MS for metalloproteomics

Anotácia:

Tato diplomová práce se zabývá možnostmi využití spojených technik kolonové gelové elektroforézy (CEGE) a hmotnostní spektrometrie s ionizací pomocí indukčně vázaného plazmatu (ICP-MS) pro analýzu metaloproteinů a kov vážících proteinů. Práce je zaměřena na nalezení vhodných podmínek pro separaci modelových vzorků pomocí preparativní polyakrylamidové gelové elektroforézy v denaturujících (SDS-PAGE) i nativních podmínkách (QPNC-PAGE). Separované frakce byly analyzovány pomocí fluorescenční spektrometrie a ICP-MS. Je diskutována koeluce proteinu a kovové specie a možnost on-line spojení kolonové gelové elektroforézy s detekčními technikami při analýze metaloproteinů.

Abstract:

This diploma thesis studies the possibility of using hyphenated techniques of continuous (preparative) gel electrophoresis and inductively coupled plasma-mass spectrometry (ICP-MS) for analysis of metalloproteins and metal-binding proteins. The thesis is focused on finding appropriate separation conditions for model samples. Preparative continuous polyacrylamide gel electrophoresis has been operated in denaturing (SDS-PAGE) and native conditions (QPNC-PAGE). Separated fractions were analyzed using fluorescence spectrometry and ICP-MS. Co-elution of protein and metal species is discussed as well as on-line coupling continuous gel electrophoresis with detection techniques in the analysis of metalloproteins.

Kľúčové slová

metaloproteiny, kov vážící proteiny, kolonová (preparativní) gelová elektroforéza, CEGE, ICP-MS, metalloproteins, metal-binding proteins, collumn (continuous) gel electrophoresis

Jazyk práce: Czech

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 29. 4. 2011

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 13. 6. 2011
• Vedúci: prof. RNDr. Viktor Kanický, DrSc.

Masaryk University

Faculty of Science

Master programme / odbor:
Chemistry / Upper Secondary School Teacher Training in Chemistry