Identifikace antierytrocytárních protilátek u těhotných žen - porovnání metody titrace protilátek pomocí sloupcové gelové aglutinace a zkumavkové metody

Markéta TICHÁ

Bachelor's thesis

Identification of anti-erythrocyteantibodies in pregnant women's blood comparison of different methods of antibody titre testing (column gel agglutination method and test tube method)

Abstract:

Objev krevního oběhu a objev nových krevních systémů souvisel s rozvojem imunohematologických metod.V 17.století byl objeven krevní oběh.To znamenalo velký vědecký rozvoj pro hematologii.První krevní převod se uskutečnil v roce 1665.Neúspěšné transfuze zvířecí krve zpochybnily tuto metodu a zájem o transfuze opadl.Profesor Blundell zdůraznil správnou zásadu o převodu pouze lidské krve.Hlavní příčinou neúspěchu transfuzebyla neznalost krevních skupin.K objevení krevních skupin došlo ve 20.stol.Ve všeobecnou známost vstoupily zásluhou Karla Landsteinera a také Jana Jánského.První objevený krevní systém je AB0.Je to nejdůležitější krevní systém,který byl popsán Karlem Landsteinerem v r.1900.Nejpolymorfnější systém,který má největší aloimunogenitu je Rh systém.První údaj o Rh systémupochází z r.1939.Objev krevních skupinových systémů měl velký vliv na rozvoj laboratorních metod k určení antigenů těchto systémů a také na rozvoj metod,které používáme k průkazu erytrocytárních protilátek.Aglutinační metoda je nejvhodnější metodak určování protilátek proti erytrocytům.Erytrocyty,které jsou senzibilizovány protilátkou,tvoří aglutinaci,kterou lze pozorovat makroskopicky.Těhotné ženy vytvářejí protilátky proti antigenům na erytrocytech plodu proniknutím fetálních erytrocytů do jejich oběhu.Vyšetření antierytrocytárních protilátek by mělo vést k včasné diagnóze možného rozvoje hemolytického onemocnění novorozence,sledování plodu jinou než imunohematologickou metodou,určení vhodné léčby hemolytického onemocnění novorozence.Hemolytické onemocnění novorozence je nemoc,u které je charakteristické zkrácené přežívání erytrocytů plodu a novorozence.V roce 1939 Levin a Stetson prokázali,že žena může být imunizována během těhotenství proti krevně skupinovým antigenům,které se vyskytují na erytrocytech dítěte a u matky chybí.Mateřské protilátky se váží na specifické antigeny fetálních a novorozeneckých erytrocytů,které následně hemolyzují.Onemocnění může mít různě těžký průběh.Bývá příčinou závažné fetální a novorozenecké morbidity a mortality.Především protilátky specifity anti-D,-c,-E,-K mohou způsobit těžké hemolytické onemocnění novorozence a vyžadují přísnější sledování.Placentou pronikají pouze imunoglobuliny typu IgG s nízkou molekulovou hmotností,a to do 24.týdne těhotenství velmi pomalu.Velmi rozšířenou a úspěšnou metodou v prevenci hemolytického onemocnění novorozence bylo zavedení profylakticky podávaného anti-D imunoglobulinu.Tématem této práce je vyšetření a sledování potencionálně rizikové skupiny těhotných žen vhodnou imunohematologickou metodou,jejichž plod nebo novorozenec je ohrožen možným hemolytickým onemocněním novorozence.Titrační vyšetření je široce dostupné orientační vyšetření,které se běžně používá ke sledování těhotných s klinicky významnými protilátkami.Sleduje se při tom hodnota titru a její změna s postupujícím těhotenstvím,porovnávaná v po sobě následujících vyšetřeních.V období od 1.1.2011-31.7.2013 bylo vyšetřeno v prenatální laboratoři na Transfuzním oddělení Nemocnice České Budějovice.5622 těhotných žen.287 těhotných žen bylo v průběhu těhotenství aloimunizováno a byly u nich zjištěny protilátky proti antigenům na erytrocytech plodu.Všechny ženy byly vyšetřeny metodou sloupcové gelové aglutinace,vč.vyšetření titru protilátky.U 31 vzorků těhotných žen byl vyšetřen titr protilátek zkumavkovou metodou.

Abstract:

The discovery of blood flow and new blood systems was connected with the development of the immunohematology methods.The blood flow was discovered in the 17th century.This meant great scientific development for haematology.The first blood transfusion was carried out in1665.The transfusion of animal blood was unsuccessful and cast doubt on this method.As a result of this,the interest in this method decreased.Blundell emphasizedthe importance of human blood transfusion.The main reason for failure of first transfusions was the ignorance of blood types(blood groups).The blood types were discovered in the 20th century.The blood groups became well known thanks to Landsteiner and also to Jánský.The first discovered blood system is AB0.It is the most important blood system which was described by Landsteiner in1900.The most polymorphous system which has got the biggest aloimmunogenicity is the Rh blood group system.The first records of the Rh blood group system date back to1939.The discovery of blood group systems had a great impact on further development of lab methods for identification of the antigens of these systems.It also contributed to the development of methods which we use to prove the presence of the erythrocytes antibodies.Agglutinin method is the most suitable method for identification of antibodies against erythrocytes.Erythrocytes which are sensitized by antibody create agglutination which can be observed under a microscope.Pregnant women produce antibodies against antigens on the erythrocytes of embryos leak of erythrocytes into their blood flow.Testing of antierythrocyte antibodies should lead to early diagnoses of possible development of haemolytic disease of the newborns;to monitoring of embryo with the use of other method than immunohaematological method;to determination of the suitable therapy of the haemolyticdisease of the newborn.The haemolytic disease of the newborn is a disease,for which shortened survival of the embryo's and the newborn'serythrocytes is characteristic.In1939 Levin a Stetson proved that woman can be immunised during her pregnancy against blood group antigens which occur on baby'serythrocytes but aren't present at the mother's side.Mother's antibodies are tied to specific antigens of the fetal and newborn erythrocytes,which later haemolyse.The disease can have different course.It causes serious fetal and newborn morbidity and mortality.Especially the antibodies anti-D,-c,-E,-K can cause serious haemolytic disease of the newborn and requirecareful monitoring.Only IgG with low molecular weight penetrate through placenta(until the 24th week of pregnancy very slowly).The introduction of anti-D Ig(given prophylactically)became a very common and successful method for prevention of haemolytic disease of the newborn.The theme of this thesis is the examination and monitoring of potentially risk group of pregnant women,whose embryo is threatened by possible haemolytic disease of the newborn,with the use of suitable immunohaematological method.Titre testing is generally accessible indicative testing,which is used to monitor pregnant women with clinically significant level of antibodies.The level of antibodies in a blood sample measured using the antibody titre test is repeatedly monitored during the whole pregnancy and the results from every two successive measurements are compared.Between Jan 2011-Jul 2013 5622pregnant women were tested in prenatal laboratory in the Blood Bank Department of Hospital České Budějovice.281pregnant women were aloimmunized during their pregnancy and antibodies against antigens on erythrocytes of their embryos were found in their blood.All women were tested using the method of column gel agglutination,including antigen titre testing.In 31samples of pregnant women the antibody titre was tested using the test tube method.

Keywords

antierytrocytární protilátky, hemolytické onemocnění novorozence, imunoprevence, titrace protilátek

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 5. 5. 2014

Accessible from:: 5. 5. 2014

Thesis defence

• Supervisor: MUDr. Petr Biederman

UNIVERSITY OF SOUTH BOHEMIA IN ČESKÉ BUDĚJOVICE

Faculty of Health and Social Studies

Bachelor programme / field:
Specialization in Health Service / Zdravotní laborant