Jaderně topografická analýza teritoria chromozomu 1 a lokusu 1q21 v buňkách mnohočetného myelomu pomocí konfokální mikroskopie s vysokým rozlišením

Bc. Soňa Legartová, Ph.D.

Diplomová práce

Nuclear topography of chromosome territory HSA1 and genomic locus 1q21 in multiple myeloma cells using high ressolution confocal microscopy

Anotace:

Anotácia Mnohopočetný myelom je zhubné plazmocelulárne ochorenie, pre ktoré je charakteristické komplexné zmeny karyotypu. V súčasnej dobe sa prestavba chromozómu 1, konktrétne oblasti 1q21, ukazuje ako významný prognostický faktor ochorenia (jeho vývoja, agresivity a reakcie na liečbu). V našich experimentoch boli študované modelové bunkové ARH-77 (CD138^-) a MOLP-8 (CD138^+), ktoré boli vystavené cytostatickému pôsobeniu a γ-žiareniu a zároveň: lymfocyty zdravého darcu a malígne CD138^+ bunky izolované z kostnej drene pacienta s mnohopočetným myelomom. Pri spracovaní diplomovej práce boli stanovené proliferačné charakteristiky buniek línií. Pre analýzu štruktúry chromatínu, jadrovo-topografického usporiadania teritória chromozómu 1 a lokusu 1q21, bola využitá metóda fluorescenčnej in situ hybridizácie (FISH) v kombinácii s laserovým konfokálnym mikroskopom s vysokým rozlíšením. Doplňujúcou bola analýza množstva proteínu Mcl-1 kódovaného génom mapovaného v oblasti 1q21.

Abstract:

Abstract Multiple myeloma (MM) is a malignant plasma cell disorder characterized by complex karyotypes instability. Recent studies have shown that aberrations of chromosome 1, especially amplifications of 1q21 region, are associated with the malignant phenotype including drug resistance. This locus seems to be an important prognostic factor in this type of tumor. In our experiments we studied the model multiple myeloma cell lines ARH-77 (CD138^-) and MOLP-8 (CD 138^+) after treatment by cytostatic agents and γ-irradiation as well as lymphocytes of healthy donor and malignant CD138^+ cells isolated from the bone marrow of patient with MM. Proliferation characteristics of the cell lines after cytostatic treatment were determined. We focused on nuclear topography of the chromosome 1 territory and locus 1q21 and used fluorescence in situ hybridization (FISH) combined with laser confocal microscopy with high resolution for these analyses. In addition, the level of Mcl-1 protein, coded by gene localized in region 1q21, was studied.

Klíčová slova

multiple myeloma, nuclear topography, FISH, confocal microscopy, Mcl-1

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 18. 1. 2008

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 6. 2. 2008
• Vedoucí: Mgr. Jana Krejčí, Ph.D.
• Oponent: prof. RNDr. Vladimír Vetterl, DrSc.

Masarykova univerzita

Přírodovědecká fakulta

Magisterský studijní program / obor:
Fyzika / Biofyzika