Rezistence bakterií k antimikrobním přípravků a možnosti její genetické detekce

Pavla HLAVÁČKOVÁ

Bakalářská práce

Bacterial resistance to antimicrobial agents and the options for its genetic detection

Anotace:

Rezistence enterobakterií k ?-laktamovým antibiotikům, podmíněná produkcí širokospektrých ?-laktamáz, představuje v součastné době významný problém, a to nejenom z klinického, ale i diagnostického hlediska. Včasná a hlavně přesná detekce vede k zahájení adekvátní antibiotické terapie a tím významným způsobem přispívá ke zlepšení zdravotního stavu pacienta. Na detekci produkce širokospektrých ?-laktamáz lze použít metod fenotypových nebo genetických. Výhodami genetické detekce jsou pak jejich rychlost a přesnost. Cílem bakalářské práce bylo zhodnocení aktuální problematiky bakteriální rezistence se zaměřením na vybraný mechanizmus rezistence, oblast bakteriálních ?-laktamáz a genetická charakterizace izolátu Klebsiella pnemoniae s produkcí těchto širokospektrých enzymů od pacientů v intenzivní péči. Podle nejnovějších údajů je dnes známo přes 950 jedinečných a přirozeně se vyskytujících ?-laktamáz, které je možno rozdělit do 4 skupin podle substrátové specifity, přičemž největší skupinu tvoří právě širokospektré ?-laktamázy. Výskyt kmenů Klebsiella pneumoniae rezistentních k cefalosporinům III. generace dosahuje v České republice hodnoty 48,2 %, čímž se naše země řadí mezi ty, u kterých tyto rezistentní bakterie představují významný problém. V rámci bakalářské práce byla provedena amplifikace bla genů, kódujících produkci ?-laktamáz TEM, SHV a CTX-M typu a sledován jejich výskyt pomocí PCR a gelové elektroforézy. U 99-ti izolátů ze 100 byl potvrzen výskyt genů kódujících produkci těchto enzymů. Nejpočetnější skupinou byla kombinace blaSHV, blaTEM a blaCTX-M.

Abstract:

Resistance of enterobacteria to ?-lactam antibiotics due to extended-spectrum ?-lactamase production represents today a serious problem not only in the clinical practice but also in the diagnostic area. Early and accurate detection could contribute to rational prescription of antibiotics and to the improvement of patients´ health. There are various phenotypic and genetic methods used for the detection of extended-spectrum ?-lactamases. The advantages of the genetics methods are their speed and accuracy. The first aim of the bachelor study was to assess the actual situation of bacterial resistance in the area of ?-lactamases. The second aim was the genetic characteristic of Klebsiella pnemoniae isolates with the production of extended-spectrum ?-lactamases obtained from the patients in intensive care. According to the newest data over than 950 unique, naturally occurring ?-lactamases are known. Four major groups of these enzymes can be identified based on substrate specificities. The occurrence of Klebsiella pnemoniae strains resistant to third generation cephalosporins reaches in the Czech Republic the value 48.2%. Therefore our country could be classified as a country with a significant problem with this type of resistant bacteria. In the bachelor work, the amplification of bla genes, encoding production of TEM, SHV and CTX-M ?-lactamases was carried out. The presence of different types of ?-lactamases was established using PCR and gel electrophoresis method. The occurrence of bla genes was confirmed in 99 of 100 isolates. The presence of the combination blaSHV, blaTEM a blaCTX-M was the most frequent.

Klíčová slova

rezistence, Klebsiella pneumoniae, ?-laktamázy, antibiotika, jednotka intenzivní péče, genetická detekce

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 14. 5. 2012

Zveřejnit od: 14. 5. 2012

Obhajoba závěrečné práce

• Vedoucí: Ing. Magdaléna Chromá, Ph.D.

UNIVERZITA PALACKÉHO V OLOMOUCI

Přírodovědecká fakulta

Bakalářský studijní program / obor:
Fyzika / Molekulární biofyzika