Vliv účinných složek rybího tuku v krmné dávce prasat na expresi vybraných proteinů modulujících zánětlivou reakci.

Bc. Rea Jarošová

Master's thesis

Influence of the active ingredients of fish oil on the feeding of pigs on the expression of selected proteins modulating the inflammatory response.

Abstract:

Cílem této práce bylo zjistit skutečnost, zda existuje vliv účinných složek rybího tuku, především polynenasycených mastných kyselin n3 (PUFA n3) na expresi vybraných proteinů modulující zánětlivou reakci u modelového organismu prasete. U PUFA n3 je předpoklad, že přes signální dráhu PPARgamma, NFkappa B zvyšují produkci adiponektinu, inhibují tvorbu prozánětlivých cytokinů, zvyšují tvorbu protizánětlivých cytokinů a tím potlačují zánětlivou reakci v organismu. Tato hypotéza byla testována na 32 prasatech, která byla rozdělena do dvou skupin po 16 kusech v každé skupině. První experimentální skupina byla krmena základní krmnou směsí obohacenou o 2,5 % rybího oleje (F) a druhá kontrolní skupina byla krmena základní krmnou směsí s 2,5 % palmového oleje (P). 70. den výkrmu bylo 8 F prasatům a 8 P prasatům aplikován intravenózně lipopolysacharid (LPS) pro vyvolání zánětlivé reakce, zbytek ponechán bez stimulace LPS, následovala intramuskulární aplikace anestetik a porážka. Pomocí metody Western Blott byla změřena míra exprese proteinů PPARgamma, NFkappa B a adiponektinu ve vybraných tkáních, metodou ELISA koncentrace adiponektinu v plazmě a multiplexní analýzou plazmatické hladiny cytokinů. Výsledky ukazují, že koncentrace PPARgamma se u F adipocytů po podání LPS měla tendenci zvýšit o 21 % ve srovnání s P kontrolou ošetřenou LPS, avšak výsledek nebyl statisticky průkazný (P> 0,05; P = 0,11). Dále byla u F prasat ošetřených LPS ve srovnání s intaktními F protějšky tendence ke zvýšení plazmatické hladiny adiponektinu o 18 %, které bylo pravděpodobně odrazem tendence k vyšším hodnotám v adipocytech o 18 % (P> 0,05; p = 0,12), výsledek nebyl statisticky průkazný. Plazmatický adiponektin nabýval stejných hodnot 21,1 ng x ml-1 u experimentální i kontrolní skupiny (P> 0,05). Zvýšení (P <0,05) NFkappa B v tukové tkáni F prasat po stimulaci LPS. Dále byla u skupiny F prasat stimulovaných LPS zvýšená (P< 0,05) plazmatická hladina protizánětlivých interleukinů IL4 a IL10, ale i prozánětlivého cytokinu TNFalfa. Výsledky v předkládaném experimentu jsou tedy nejednoznačné. Hypotézu, potvrzující vliv rybího oleje, respektive PUFA n3, na potlačení zánětlivé reakce nelze tímto experimentem průkazně potvrdit.

Abstract:

The aim of this study was to determine whether there is an influence of the active components of the fish oil, in particular polyunsaturated fatty acids n3 (PUFA n3) on expression of selected proteins which modulate the inflammatory response in model organisms pig. In the n3 PUFA is to assume that over signaling pathway PPARgamma, NFkappaB, increase adiponectin production, inhibit the production of proinflammatory cytokines, increase antiinflammatory cytokines production, thereby suppressing the inflammatory response in the body. This hypothesis was tested on 32 pigs, which were divided into two groups of 16 pieces in each group. The first experimental group was fed the basic feed mixture enriched with 2.5% fish oil (F) and the second control group was fed the basic feed with 2.5% palm oil (P). Last day of fattening pigs were 8 F and 8 P pigs intravenously application lipopolysaccharide (LPS) to induce an inflammatory response, the rest of group left without LPS stimulation, followed by intramuscular application of anesthetics and defeat. By Western blot was measured protein expression PPARgamma and NFkappaB in selected tissues, by ELISA concentration of adiponectin in plasma and by multiplex analysis plasma levels of cytokines. The results indicate that PPARgamma concentration in the F adipocytes after LPS stimulation tended to increase by 21% in comparison with P control stimulation with LPS, but the result was not statistically significant (P> 0.05; P = 0.11). Further, the F pigs stimulation with LPS as compared with intact F counterparts trend toward increased plasma levels of adiponectin by 18%, which was likely a reflection of the tendency to higher values in adipocytes by 18% (P> 0.05, p = 0.12), result was not statistically significant. Plasma adiponectin took on the same values of 21.1 ng x mL-1 in experimental and control groups (P> 0.05). Elevation (P <0.05) of NFkappaB in fatty tissue F pigs after LPS stimulation. In addition, the plasma level of anti-inflammatory IL4 and IL10 interleukins, as well as the proinflammatory cytokine TNFalfa, was increased (P <0.05) in the F group of pigs stimulated with LPS. The results of the present experiment are thus ambiguous. The hypothesis of the effect of fish oil or n3 PUFA to suppress the inflammatory response cannot this experiment conclusively confirmed.

Keywords

NF-kappa B, PUFA n-3, Western-Blott

Keywords

n-3 PUFA, NF-kappa B, Western-Blott

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 25. 4. 2017

Thesis defence

• Supervisor: prof. MVDr. Ing. Tomáš Komprda, CSc.

Mendel University in Brno

Faculty of AgriSciences

Master programme / field:
Animal Breeding / Animal Biotechnology