Expresní profil miR-29b u myelomových buněčných linií ovlivněných polosendvičovými komplexy ruthenia a osmia

Bc. Dominika ŠVEHLOVÁ

Master's thesis

Expression profile of miR-29b in myeloma cell lines treated with half-sandwich Ru(II) and Os(II) complexes

Abstract:

Cílem diplomové práce bylo stanovení expresního profilu členů rodiny miR-29b - miR-29b-1-5p, miR-29b-2-5p a miR-29b-3p u myelomových buněčných linií KMS12-BM, KMS12-PE a U266 ovlivněných nově syntetizovanými polosendvičovými komplexy osmia (2b, 3b) a ruthenia (2a, 3a). Literární rešerše se zabývá charakteristikou mnohočetného myelomu, úlohou miRNAs v karcinogenezi a jejich vliv na patogenezi mnohočetného myelomu. Dále byla popsána rodina miR-29, do které patří námi studované miR-29b, a vliv jednotlivých miRNA na proliferaci myelomových buněk a indukci apoptózy. Poslední část literární rešerše se zaměřovala na molekulárně-biologickou charakteristiku apoptózy. V experimentální části byly studovány změny expresního profilu členů miR-29b u buněk myelomových linií ovlivněných testovanými komplexy v souvislosti s jejich pro-apoptotickým potenciálem u myelomových linií. Pomocí kvantitativní polymerázové řetězcové reakce bylo zjištěno, že testovaná látka 2b měla vliv na zvýšení relativní hodnoty exprese miR-29b u buněčných linií KMS12-PE a U266. Výsledky stanovení apoptózy u myelomové linie U266 naznačují, že zvýšené hodnoty exprese miR-29b zřejmě souvisí s pro-apoptotickým účinkem látky 2b. Testovaná látka 3b vykazovala nižší úroveň exprese miR-29b a menší pro-apoptotický potenciál u ovlivněných myelomových linií. Pro lepší pochopení a potvrzení mechanismu pro-apoptotického účinku testovaných látek na miR-29b by bylo nutné provést další doplňující a potvrzující experimenty.

Abstract:

This thesis focuses on the expression analysis of miR-29b members - miR-29b-1-5p, miR-29b-2-5p and miR-29b-3p in the used myeloma cell lines KMS12-BM, KMS12-PE and U266 treated with half-sandwich Os(II) and Ru(II) complexes used as experimental substances - 2a, 2b, 3a, and 3b as well. The literature review deals with the characteristics of multiple myeloma disease, the role of miRNAs in carcinogenesis and their influence on the pathogenesis of multiple myeloma. Furthermore, the miR-29 family, which includes the studied miR-29b, and the effect of individual miRNAs on the proliferation of myeloma cells and the induction of apoptosis was described. The last part of the literature research focused on the molecular-biological characteristics of apoptosis. The experimental part dealt with the effect of the tested substances on a change of the expression profile of studied miR-29b members in treated cells of myeloma cell lines in relation to their pro-apoptotic potential. Using quantitative polymerase chain reaction, we have found that tested 2b substance had effect on increase of the relative expression level of miR-29b in KMS12-PE and U266 cell lines. Detected apoptosis in the myeloma cell line U266 indicate that the increased value of miR-29b expression is probably related to the pro-apoptotic effect of used 2b substance. Tested 3b substance showed a lower level of normalized miR-29b expression and less pro-apoptotic potential in treated myeloma lines in comparison to myeloma cells treated with the 2b substance. To a better understanding and confirmation of the mechanism of the pro-apoptotic effect of the tested substances on miR-29b, it would be necessary to perform additional and confirmatory experiments.

Keywords

Mnohočetný myelom, rodina miR-29, miR-29b, miR-29b-1-5p, miR-29b-2-5p, miR-29b-3p, apoptóza

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 30. 4. 2024

Thesis defence

• Supervisor: Ing. Kateřina Smešný Trtková, CSc.

Palacký University Olomouc

Faculty of Science

Master programme / field:
Molecular and Cell Biology / Molecular and Cell Biology