Zavedení blotovacích technik pro detekci biomarkerů Alzheimerovy choroby

Mgr. Jitka Kašparová

Master's thesis

Implementation of blotting techniques for detection of biomarkers of Alzheimer's disease

Abstract:

Diplomová práce se zabývá zavedením blotovacích technik (Dot-Blot, 1-D a 2-D Western Blot) a isoelektrické fokusace v kombinaci s následnou blotovací technikou a imunochemickou detekcí pro biomarkery Alzheimerovy choroby (AD), konkrétně A 1-42 a celkového tau proteinu. Součástí práce je optimalizace dílčích vybraných separačních a analytických metod v kombinaci s různými způsoby detekce kolorimetrie, chemiluminiscence) a porovnání citlivostí daných detekcí pro jednotlivé metody a biomarkery. Chemiluminiscence jako nejcitlivější detekce je poté použita k průkazu biomarkerů AD získaného z reálného biologického vzorku (CSF) pomocí vysoce účinné metody 2-D elektroforézy.

Abstract:

This thesis deals with implementation of blotting techniques (Dot-Blot, 1-D and 2-D Western Blot) and isoelectric focusing with blotting technique and immunochemical detection of biomarkers of Alzheimer's disease (AD), specifically A 1-42 and total tau protein. This thesis includes optimalization of procedures of each method and their combination with different detection systems (colorimetry, chemiluminescence). These detection systems are compared for each method by sensitivity. Finally the chemiluminiscence as the detection with highest sensitivity is used for detection of biomarkers of AD separated from biologic sample (CSF) by 2-D electrophoresis.

Keywords

Alzheimerova choroba, Amyloid beta, Tau protein, Dot-Blot, Western Blot, 2-D elektroforéza

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 9. 5. 2014

Thesis defence

• Date of defence: 3. 6. 2014
• Supervisor: Mgr. Barbora Jankovičová, Ph.D.

University of Pardubice

Faculty of Chemical Technology

Master programme / field:
Special Chemical and Biological Programmes / Analysis of Biological Materials