Inhibice transkripce indukovaná vybranými protinádorově účinnými komplexy platiny v lidských nádorových buňkách.

Bc. Monika TRTÍKOVÁ

Master's thesis

Induced inhibition of transcription by selected antitumor platinum complexes in human cancer cells

Abstract:

Platinové komplexy jako je cisplatina se mohou vázat na DNA za tvorby různých typů aduktů např. vnitrořetězcových či meziřetězcových můstků. V případě, že tyto léze nejsou odstraněny opravnými buněčnými mechanismy, může docházet mimo jiné k inhibici replikace a transkripce, v konečném důsledku pak až k indukci programované buněčné smrti. Tohoto faktu se využívá v medicíně, protože můstky a další adukty platinových léčiv vznikají hlavně v rychle se dělících buňkách včetně nádorových. Cisplatinu a její analoga lze tedy použít k léčbě některých typů rakoviny. I přes vysokou protinádorovou účinnost má léčba uvedenými platinovými sloučeninami své nevýhody a omezení, proto jsou syntetizovány a testovány nové potenciální protinádorové léky a zkoumán jejich mechanismus účinku. Cílem diplomové práce bylo studovat vliv kovových komplexů s protinádorovým účinkem, konkrétně cisplatiny a BBR3464, na inhibici transkripce v lidských nádorových buňkách. Inhibice transkripce byla měřena pomocí luciferázového reportérového testu na buněčné linii A2780 transfekované plasmidem pCMV-Gluc2 globálně modifikovaným výše zmíněnými látkami. Bylo zjištěno, že komplex BBR3464 inhibuje transkripci více než cisplatina. BBR3464 může tvořit jiné typy aduktů, které zřejmě představují větší blok pro RNA polymerázu a jsou buňkou hůře opravitelné, proto je inhibice transkripce ve srovnání s mononukleární cisplatinou mnohem vyšší. Inhibice transkripce tedy představuje důležitý základ mechanismu biologického účinku látky BBR3464, která je kandidátem pro využití v protinádorové terapii.

Abstract:

Platinum complexes like cisplatin can bind to DNA and form various types of adducts, e.g. intrastrand or interstrand crosslinks. If these lesions are not removed or repaired by cellular mechanisms, it can inhibit replication and transcription. This mechanism can be use in medicine, where crosslinks and other platinum drug adducts are formed mainly in rapidly dividing cells (including cancer cells). Cisplatin and its analogues are clinically used for treating some types of cancer. Despite the high antitumor efficacy, treatment with these platinum compounds has its disadvantages and limitations, due to this fact new potential antitumor drugs are synthesized and their mechanism of action is investigated. The aim of the diploma thesis was to study the effect of metal complexes with antitumor activity, namely cisplatin and BBR3464, on the inhibition of transcription in human cancer cells. Transcriptional inhibition was measured using the luciferase reporter assay on the A2780 cell line with the plasmid pCMV-Gluc2 globally modified by above mentioned substances. Inhibitory activity of BBR3464 was more profound compared to cisplatin. BBR3464 probably creates different types of aducts which block RNA polymerase more efficiently and this adduct are more difficult to repair by cellular repair mechanism, this results in higher transcriptional inhibition compared to mononuclear cisplatin. Inhibition of transcription is an important basis of mechanism of biological action of BBR3464, which is a candidate for use in antitumour therapy.

Keywords

cisplatina, inhibice transkripce, luciferázový test

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 3. 5. 2021

Thesis defence

• Supervisor: Mgr. Jitka Prachařová, Ph.D.

Palacký University Olomouc

Faculty of Science

Master programme / field:
Biotechnology and Gene Engineering / Biotechnology and Gene Engineering