Imobilizace proteinu na magnetické částice

Bc. Michal Sedlák

Bachelor's thesis

The immobilization of the protein onto magnetic particles

Abstract:

Imobilizace proteinů na pevný nosič umožňuje snadnější manipulaci a může zlepšit jejich stabilitu. Existuje velké množství imobilizačních postupů, díky nimž lze proteiny uchytit k nejrůznějším nosičům. V této práci byl na magnetické mikročástice kovalentně imobilizován hovězí sérový albumin (BSA), který je nejvíce zastoupeným proteinem krevní plazmy a svou afinitou k léčivům významně ovlivňuje jejich účinek. Celý proces imobilizace byl ovlivněn požadavkem na následné využití magnetických částic k tvorbě afinitní kolony v afinitní kapilární elektrochromatografii ke stanovení vazebných parametrů mezi BSA a malými ligandy / léčivy. Práce se zabývala optimalizací procedury imobilizace BSA na magnetické částice. Použité postupy vycházejí z informací získaných z literatury a ze zkušeností pracoviště. Hodnocení úspěšnosti imobilizace bylo provedeno na základě množství imobilizovaného BSA a na schopnosti imobilizovaného BSA vázat malé ligandy jako jsou např. léčiva.

Abstract:

Immobilization of proteins on a solid support allows for easier handling and can improve their stability. There are a large number of immobilization procedures that allow proteins to be attached to a variety of carriers. In this work, bovine serum albumin (BSA), which is the most abundant plasma protein and its affinity for drugs significantly affects their effect, was covalently immobilized on magnetic microparticles. The whole immobilization process was influenced by the requirement for the subsequent use of magnetic particles to form an affinity column in affinity capillary electrochromatography to determine the binding parameters between BSA and small ligands / drugs. The work dealt with the optimization of the BSA immobilization procedure on magnetic particles. The used procedures are based on information obtained from the literature and the experience of the workplace. Evaluation of immobilization success was performed based on the amount of immobilized BSA and the ability of the immobilized BSA to bind small ligands such as drugs.

Keywords

kovalentní imobilizace, magnetické mikročástice, albumin, covalent immobilization, magnetic microparticles

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 17. 6. 2020

Thesis defence

• Date of defence: 15. 7. 2020
• Supervisor: Mgr. et Mgr. Lenka Michalcová, Ph.D.
• Reader: Mgr. Marta Pelcová, Ph.D.

Masaryk University

Faculty of Science

Bachelor programme / field:
Biochemistry / Biochemistry