Stanovení antioxidační aktivity rostlinných extraktů in-vitro

Ursula FERRETTI

Bachelor's thesis

The determination of the plant extracts antioxidant activity in-vitro

Abstract:

Stresové faktory způsobují v rostlinách nadměrnou produkci aktivních forem kyslíku a dusíku (AFK/D). Rostliny se proti AFK/D brání antioxidačními ochrannými systémy (AOX). Pokud tyto selžou, dochází ke vzniku oxidativního stresu. Tato bakalářská práce se zabývá spektrofotometrickým stanovením a porovnáním antioxidační aktivity extraktů listů ječmene jarního (Hordeum vulgare L. cv. Bonus), vystavovaného zvýšené dávce UV-B záření ve srovnání s rostlinami kontrolními. Za tímto účelem byly zavedeny a zkalibrovány metody spektrofotometrického stanovení antioxidační aktivity in-vitro (metoda ABTS, DPPH a FRAP). Ke kalibraci těchto metod bylo použito antioxidačního standardu Troloxu. Z výsledků byla stanovena optimální doba reakce vzorku s měřícími roztoky. V rámci experimentu bylo zjištěno, že výsledky metod vzájemně korelují ? lineární závislost (korelační koeficient z lineární regrese ABTS x DPPH = 0,9407, ABTS x FRAP = 0,9962 a DPPH x FRAP = 0,976). Z výsledků byla patrná mírně vyšší antioxidační aktivita (redukční síla) extraktů, pořízených z rostlin vystavených zvýšené dávce UV-B záření oproti kontrolním rostlinám. Byl také zpozorován mírný nárůst antioxidační aktivity (redukční síly) vzorků s klesající polaritou rozpouštědel použitých k extrakci. Nakonec bylo zjištěno, že námi připravené roztoky ABTS?+ jsou vhodné spíše k měření vzorků vykazujících nižší antioxidační aktivitu, zatímco pro měření vyšší antioxidační aktivity (redukční sílu) je lepší použít roztoky DPPH a FRAP.

Abstract:

Stress factors cause in plants an excessive production of reactive oxygen and nitrogen species (RONS). The plants resist the RONS with antioxidant defence systems (ADS). If these fail, the formation of the oxidative stress takes place. This bachelor thesis deals with the spectrophotometric determination and comparison of antioxidant activity of extracts from leaves of barley (Hordeum vulgare L. cv. Bonus), which was exposed to UV-B radiation against the control plants. For this purpose have been established and calibrated spectrophotometric methods for determination of antioxidant activity in-vitro (methods ABTS, DPPH and FRAP). For the calibration of these methods were used the antioxidant standard Trolox. From the results were determined the optimal reaction time of the sample with the measurement solutions. In the experiment was found that the results of the methods correlate with each other ? linear dependence (correlation coefficient of linear regression ABTS x DPPH = 0,9407, ABTS x FRAP = 0,9962 and DPPH x FRAP = 0,976). From the results was evident a slightly higher antioxidant acitivity (reducing power) of extracts taken from plants exposed to elevated doses of UV-B radiation compared to control plants. It was also observed a slight increase in antioxidant activity (reducing power) of samples with decreasing polarity of solvents used for the extraction. Finally was found that our prepared ABTS solutions are more appropriate for measuring samples showing lower antioxidant activity, while for measurind higher antioxidant acitivity (reducing power) is preferable to use the DPPH and FRAP solutions.

Keywords

Stresové faktory, aktivní formy kyslíku a dusíku (AFK/D), antioxidační ochranné systémy (AOX), oxidativní stres, ABTS, FRAP, DPPH

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 19. 4. 2012

Accessible from:: 19. 4. 2012

Thesis defence

• Supervisor: Mgr. Jakub Nezval

University of Ostrava

Faculty of Science

Bachelor programme / field:
Biology / Experimental Biology