Role mezibuněčné komunikace GJIC v toxicitě, karcinogenezi a chemoprevenci.

Bc. Lukáš Tomíček

Master's thesis

Role of intercellular communication GJIC in toxicity, carcinogenesis and chemoprevention.

Abstract:

V této práci se zaměřujeme na chemopreventivní vlastnosti a účinky fytochemikálií. Hlavní oblast zájmu spočívá ve zkoumání účinků těchto látek na mezibuněčnou komunikaci, která je zprostředkována pomocí mezerových spojů. Přesněji typem označovaným jako GJIC. Zkoumali jsme její využití jako biomarkeru toxických, karcinogeních a chemopreventivních účinků chemických látek. Na základě literární rešerše bylo postupně vybráno devět fytochemikálií se známými chemopreventivními nebo protinádorovými účinky, u kterých se proto předpokládal také významný efekt na GJIC. Těmito látkami byly kyselina gallová, kyselina kávová, 6-benzylaminopurin, andrographolid, artesunát, fenetylisokyanát, plumbagin, naringenin, β-sitosterol. Hodnocení mezibuněčné komunikace a testování fytochemikálií bylo prováděno na linii epiteliálních buněk z jater potkana WB-F344 a na transformované linii WB-ras pomocí metody SL/DT. Ke stanovení cytotoxicity bylo provedeno pomocí in vitro testu, který kombinuje měření tří různých parametrů životaschopnosti buněk.

Abstract:

In this thesis we focus on the chemopreventive activity and effects of phytochemicals. The thesis was primarily focused on the effects of these substances on the intercellular communication mediated by gap junctions, so-called gap junctional intercellular communication (GJIC). We investigated use of GJIC as a biomarker of toxic, carcinogenic and chemopreventive effects of chemical substances. Nine phytochemicals were selected based on their chemopreventive and anticarcinogenic effecst reported in the literature, which indicated also possible effects on GJIC. First, we evaluated ability of these phytochemicals to maintain functional GJIC after exposure of the cells to tumor promoters and environmental toxicants inhibiting GJIC (fluoranthene, lindane and TPA), which were selected based on a literature review. Effects of phytochemicals on GJIC were evaluated using rat liver epithelial cell line WB-F344 and tumorigenic cell line WB transformed by H-ras oncogen SL/DT assay employing.

Keywords

karcinogeneze, GJIC, chemoprevence, fytochemikálie, mezibuněčná komunikace, mezerové spoje, MAPK, CAPE, kyselina kávová, CA, BAP, 6-benzylaminopurin, WB-F344, WB-ras, WB-neo, SL/DT, neutrální červeň, carcinogenesis, chemoprevention, phytochemicals, intercellular communication, gap junction, caffeic acid, 6-benzylaminopurine, neutral red

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 6. 1. 2015

Thesis defence

• Date of defence: 3. 2. 2015
• Supervisor: RNDr. Pavel Babica, Ph.D.

Masaryk University

Faculty of Science

Master programme / field:
Biochemistry / Analytical Biochemistry