In vitro kultury kari (Murraya koenigii L.)

Martina Hradcová

Bachelor's thesis

In vitro cultures of curry leaves (Murraya koenigii L.)

Abstract:

Tato bakalářská práce se zabývá rostlinou Murraya koenigii (L.) Spreng. z čeledi Rutaceae Juss., její mikropropagací pomocí nodálních a listových explantátů a sestavením vhodného sterilizačního postupu pro tuto rostlinu bez využití chloridu rtuťnatého. Murraya koenigii pochází z jižní a jihovýchodní Asie, kde se využívá jako léčivá a kořeninová rostlina. Z důvodu obsahu biologicky aktivních látek (zejména karbazolových alkaloidů) se tak stala zajímavou surovinou pro farmaceutický průmysl. V praktické části této práce byly založeny in vitro kultury z litových čepelí a příčně a podélně řezaných nodů z mladých výhonů. Jako kultivační médium pro indukci výhonů bylo použito polotuhé MS médium obohacené o různé kombinace regulátorů růstu. Během kultivace došlo nejen k tvorbě výhonů z nodálních kultur, ale i k tvorbě kalusu a výhonu na listových kulturách. Po úspěšné indukci výhonů byly explantáty přesazeny do zakořeňovacího média, jehož základem bylo opět MS médium doplněné o regulátory růstu. Pro indukci výhonů z nodálních explantátů bylo nejúčinnější MS médium obohacené o 2,50mg/ BAP, 2,50 mg/l kinetinu a 0,25 mg/l IBA. Nody kultivované ve vertikální poloze v tomto médiu vyprodukovaly průměrně 2,77 výhonů na explantát. V kulturách listů byl vyprodukován kalus a v jednom případě i výhony. Nejúspěšnější mkultivační médium pro kultury listů se skládalo z MS média doplněného o 7,50 mg/l BAP, 2,50 mg/l kinetinu, 0,25 mg/l IBA, 0,01 mg/l GA3 a 0,05 mg/l NAA. Pro indukci kořenů bylo použito MS médium doplněné o 0,5 mg/l IBA a 1,0 mg/l NAA. Indukce kořenů na tomto kultivačním médiu nebyla úspěšná, kultury tedy nemohly být převedeny do ex vitro podmínek. Pro sterilizaci explantátů bez použití HgCl2 byly použity různé kombinace a koncentrace roztoků etanolu a NaClO. Nejúspěšnější metodou bylo umístění explantátů na 25 minut do 20% roztoku NaClO a následně na 10 minut do 70% roztoku etanolu.

Abstract:

This bachelor thesis deals with Murraya koenigii (L.) Spreng. of the Rutaceae Juss. family, its micropropagation using nodal and leaf explants, and the establishment of a suitable sterilization procedure for this plant without the use of mercuric chloride. Murraya koenigii is native to South and Southeast Asia where it is used as medicinal plant and seasoning. It has also become also an interesting plant for the pharmaceutical industry because of its content of bioactive compounds (especially carbazole alkaloids). In the practical part of this work, in vitro cultures were established from leaf blades and transversely and longitudinally cut nodes from young shoots. Semi-solid MS medium supplemented with different combinations of growth regulators was used as growth medium for shoot induction. During cultivation, not only shoot formation from nodal cultures but also callus and shoot formation on leaf cultures occurred. After successful shoot induction, explants were transplanted into rooting medium, which consisted of MS medium supplemented with growth regulators. For shoot induction from nodal explants, MS medium enriched with 2.50 mg/ BAP, 2.50 mg/l kinetin and 0.25 mg/l IBA was most effective. Nodules cultured vertically in this medium produced an average of 2.77 shoots per explant. The leaf cultures produced callus and in one case shoots. The most successful culture medium for leaf cultures consisted of MS medium supplemented with 7.50 mg/l BAP, 2.50 mg/l kinetin, 0.25 mg/l IBA, 0.01 mg/l GA3 and 0.05 mg/l NAA. For root induction, MS medium supplemented with 0.5 mg/l IBA and 1.0 mg/l NAA was used. Root induction on this culture medium was not successful, thus the cultures could not be transferred to ex vitro conditions. Different combinations and concentrations of ethanol and NaClO solutions were used to sterilize the explants without HgCl2. The most successful method was to place the explants in a 20% NaClO solution for 25 minutes and then in a 70% ethanol solution for 10 minutes.

Keywords

in vitro kultury, kari, Murraya koenigii L. Spreng., mikropropagace

Keywords

curry, Murraya koenigii L. Spreng., micropropagation, in vitro cultures

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 5. 5. 2024

Thesis defence

• Date of defence: 27. 5. 2024
• Supervisor: doc. Ing. Bc. Martin Koudela, Ph.D.
• Reader: Miroslav Jozífek, Ing.

Czech University of Life Sciences Prague

Faculty of Agrobiology, Food and Natural Resources

Bachelor programme:
Horticulture