Oxidativní poškození proteinů v lidských nádorových buňkách

Bc. Nela GALASOVSKÁ

Master's thesis

Oxidative damage of proteins in human cancer cells

Abstract:

Reaktivní formy kyslíku zahrnují jak volné radikály, tak i látky, které nejsou radikály. Jedná se o látky s dvojí povahou. Dokážou být jak prospěšné, tak i škodlivé. Při vysokých koncentracích způsobují poškození buněčných struktur, včetně lipidů, proteinů a nukleových kyselin. Oxidativní modifikace u proteinů způsobují řadu poruch a onemocnění. Mezi nejznámější patří Alzheimrova choroba a Parkinsonova nemoc. V rámci této práce byla zavedena a optimalizována metodika pro měření oxidativního poškození proteinů v nádorových buňkách A2780 pomocí SDS PAGE a western blotu. Vystavení buněk Fentonovu činidlu vedlo k jejich oxidativnímu poškození, což sloužilo jako pozitivní kontrola při optimalizaci metodiky. Po úspěšné optimalizaci metodiky bylo měřeno oxidativní poškození buněk vyvolané rotenonem, který inhibuje dýchací řetězec v mitochondriích. Výsledky prezentované v této práci potvrzují, že působení rotenonu na buňky A2780 vede k oxidativnímu poškození proteinů.

Abstract:

Reactive oxygen species include both free radicals and non-radicals. These are molecules with dual character. They can be both beneficial and harmful. At high concentrations they cause damage to cellular structures, including lipids, proteins and nucleic acids. Oxidative modifications in proteins cause a number of disorders and illnesses. Among the most well-known are Alzheimer's disease and Parkinson's disease. In this thesis a methodology for measurement of oxidative damage of proteins in A2780 tumor cells using SDS - PAGE and Western blot was introduced and optimized. Exposure of cells to the Fenton reagent led to the oxidative damage of proteins which was used as a positive control during the optimalization process. Once the optimalization was finished, the oxidative damage of cells caused by rotenone was measured. Rotenone is a chemical compound responsible for the mitochondria respiratory chain inhibition. Results presented in this thesis confirm that the exposure of A2780 cells to rotenone leads to the oxidative damage of proteins.

Keywords

oxidativní poškození, reaktivní formy kyslíku

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 28. 4. 2017

Thesis defence

• Supervisor: Mgr. Marek Rác, Ph.D.

PALACKÝ UNIVERSITY OLOMOUC

Faculty of Science

Master programme / field:
Biochemistry / Biochemistry