Molekulární a biochemické charakteristiky geneticky modifikovaných rostlin ječmene

Bc. Lucie KOCKOVÁ

Diplomová práce

Molecular and biochemical characteristics of genetically modified barley plants

Anotace:

V současné době jsou v masovém měřítku pěstovány plodiny odolné vůči herbicidům a k ničení plevelů se používají širokospektrální herbicidy. Toto je?většinou za předpokladu, že polní plodiny jsou tak geneticky upraveny, že nesou ve svém genomu zabudovaný gen, který zodpovídá za odolnost proti příslušnému herbicidu či herbicidům. Tyto herbicidy by pak následně neměly poškodit úrodu. Odolnost plodin proti širokospektrálním herbicidům tedy záleží na genech, které byly do genomu plodiny vloženy. Velmi často se jako gen zajišťující rezistenci vkládá do genomu plodin gen bar. Ten zajišťuje odolnost proti širokému spektru herbicidů, jako např. glufozinátu a Bialophosu. Pro selekci transformantů a předběžné hodnocení míry exprese cílového transgenu se současně vnáší vhodný markerový gen. Často jím bývá gen pro ?-glukuronidázu GUS, který patří mezi nejpoužívanější reportérové systémy k průkazu exprese transgenu, a zároveň umožňuje analyzovat expresi na úrovni pletiv, buněk, i celých buněčných organel.V rámci diplomové práce byly pomocí PCR a histochemické detekce přítomnosti enzymu ?-glukuronidázy detekovány transgenní rostliny jarního ječmene odrůdy Golden Promise, transformované geny bar a gus. Přítomnost genu gus byla stanovována v různých částech rostlin.

Abstract:

Modern agriculture often employs broad-spectrum herbicides combined with herbicide-resistant crops. Usually, this is achieved by altering the crop genom (genetic modification) by inserting of a specific gene coding for resistance to specific herbicide or group of herbicides. Apllying such herbicide thus results in minor crop damage. The resistence of crops against broad-spectrum herbicides depends on the genes, which were inserted into the genom. The gene bar is often used as a resistence -providing element. It mediates resistance against a broad spectrum of herbicides, such as glufosinate and Bialahops. For the selection of transformants and preliminary assessment of the target transgen expression level a suitable marker gene is simultaneously inserted. For this purpose, gene for bacterial ??glucuronidase (GUS) is often used. It is considered to be one of the most frequently used reporter systems for the assessment of transgen expression and also allows to analyze the expression on the tissue, cell and whole cell organelles levels. In this diploma thesis the PCR method and histochemical detection of the enzyme glucuronidase presence were used to detect and evaluate transgenic plants of cv. Golden Promise spring barley, modified by genes bar and gus. The presence of gus gene was determined in different parts of plants.

Klíčová slova

gus, bar, ?-glukuronidáza, Golden Promise, PCR, histochemické detekce

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 27. 4. 2012

Zveřejnit od: 27. 4. 2012

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 20. 6. 2012
• Vedoucí: RNDr. Slavomír Rakouský, CSc.

JIHOČESKÁ UNIVERZITA V ČESKÝCH BUDĚJOVICÍCH

Zemědělská fakulta

Magisterský studijní program / obor:
Zemědělské inženýrství / Rostlinné biotechnologie