Vliv expozice těžkých kovů na expresi mRNA isoforem metalothioneinu u adherentních buněčných linií

Lucie Jordanová

Bachelor's thesis

Effect of heavy metal exposure on mRNA expression of metallothionein isoforms in adherent cell lines

Abstract:

Metalothionein je malý protein bohatý na cystein, který hraje důležitou roli v homeostáze kovů a ochraně před toxicitou těžkých kovů, poškozením DNA a oxidačním stresem. Bakalářská práce byla provedena za účelem zjištění vlivu expozice těžkých kovů na expresi mRNA isoforem metalothioneinu u adherentních buněčných linií. Byl zkoumán vliv expozice zinku ve formě ZnSO4 na expresi mRNA isoforem MT-1A, MT-1X a MT-2A u adherentních buněčných linií rakoviny prsu MCF-7, MDA-MB-231 a T-47D. Pomocí MTT testu viability je zjištěno, jak se mění viabilita buněk při různých koncentracích ZnSO4 a pomocí denaturačního agarózového gelu je ověřena integrita RNA. Pro studium hladin mRNA je využita polymerázová řetězová reakce v kombinaci s reverzní transkripcí qRT-PCR.

Abstract:

Metallothionein is a small cysteine-rich protein that plays an important role in metal homeostasis and protection against heavy metal toxicity, DNA damage and oxidative stress. This bachelor thesis was conducted to investigate the effect of heavy metal exposure on the mRNA expression of metallothionein isoforms in adherent cell lines. The effect of zinc exposure in the form of ZnSO4 on the mRNA expression of MT-1A, MT-1X and MT-2A isoforms in adherent breast cancer cell lines MCF-7, MDA-MB-231 and T-47D was investigated. Using MTT viability assay, the cell viability changes at different ZnSO4 concentrations and RNA integrity is verified using denaturing agarose gel. Polymerase chain reaction combined with reverse transcription qRT-PCR is used to study mRNA levels.

Keywords

Metalothionein, těžké kovy, exprese, mRNA, expozice, isoformy, buněčné linie, rakovina prsu

Keywords

Metallothionein, expression, breast cancer, heavy metals, mRNA, exposure, isoforms, cell lines

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 28. 4. 2023

Thesis defence

• Date of defence: 5. 6. 2023
• Supervisor: Ing. Petr Michálek, Ph.D.
• Reader: Zuzana Škubalová, externi

Mendel University in Brno

Faculty of AgriSciences

Bachelor programme:
Molecular Biology and Biotechnology