Vliv vybraných agonistů PPARs na regulaci CYP epoxygenáz.

Bc. Adéla ŠPIČÁNOVÁ

Master's thesis

Effect of PPARs agonists to regulation of CYP epoxygenases.

Abstract:

Cytochromy P450 hrají důležitou roli v biotransformaci xenobiotik. Metabolismus léčiv je v současnosti spojován s mnohočetnou lékovou rezistencí, která se stala problémem při rezistenci rakovinných buněk na chemoterapii. Zajímavou skupinou CYP enzymů jsou CYP 450 epoxygenázy, do kterých patří rodiny CYP2C a CYP2J2. Tyto enzymy se nacházejí zejména v játrech, ale také v ledvinách, plicích, gastrointestinálním traktu, mozku atd. Podílejí se na metabolizmu 20 % klinicky významných léčiv, ale také mají významné endogenní funkce, převádějí kyselinu arachidonovou na epoxyeicosatrienové kyseliny (EETs), které v buňkách podporují proliferaci, brání apoptóze, účastní se buněčné signalizace, regulují transport iontů, atd. Receptory aktivované proliferátory peroxizomů (PPARs) jsou transkripční faktory, které jsou zahrnuty v celé řadě biologických procesů jako je např. zánět, proliferace, diferenciace, regulují homeostázu lipidů a glukózy. Díky jejich funkcím se staly potencionální pro chemoprevenci a terapii rakoviny. Experimentální část diplomové práce se věnuje vlivu PPAR na regulaci proteinu CYP2J2 v embryonální ledvinové buněčné linii HEK293 a nádorové jaterní buněčné linii HepG2. Obě tyto linie byly nejprve ovlivněny PPAR ligandy, fenofibrátem, bezafibrátem a gemfibrozilem. Pomocí western blot analýzy byla detekována exprese CYP2J2 proteinu.

Abstract:

Cytochromes P450 play an important role in the biotransformation of xenobiotics. Drug metabolism is currently associated with multidrug resistance which has become a problem in the resistance of cancer cells to chemotherapy. An interesting group of CYP enzymes are CYP 450 epoxygenases, which belong to a family of CYP2C CYP2J2. These enzymes are expressed in various tissues, especially in the liver but also in kidney, lung, gastrointestinal tract, brain, etc. They are involved in the metabolism of 20% of clinically important drugs. They also have important endogenous function. They convert arachidonic acid to epoxyeicosatrienoic acid (EETs), which are involved in regulation of cell proliferation, avoiding to apoptosis, cell signaling, ion transport and etc. Peroxisome proliferator-activated receptors (PPARs) are transcription factors which are included in a number of biological processes such as e.g. inflammation, proliferation, differentiation, regulate lipid and glucose homeostasis. Their functions have become potential for chemoprevention and cancer therapy. Experimental work is devoted to the influence of PPAR in the regulation of protein CYP2J2 in embryonic kidney cell line HEK293 and liver tumor cell line HepG2. Both of these lines were initially affected PPAR ligands, fenofibrate, bezafibrate and gemfibrozil. Then, changes in expression of CYP2J2 protein were estimated by western blot analysis.

Keywords

Cytochrom P450, mnohočetná léková rezistence, CYP epoxygenázy, CYP2J2, PPARs, fenofibrát, bezafibrát, gemfibrozil, buněčná linie HEK 293 a HepG2, Westtern Blott.

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 5. 5. 2015

Accessible from:: 5. 5. 2015

Thesis defence

• Supervisor: prof. MUDr. Jiří Ehrmann, Ph.D.

PALACKÝ UNIVERSITY OLOMOUC

Faculty of Science

Master programme / field:
Biology / Experimental Biology