Analýza senzorů založených na Foerstrově rezonančním energetickém přenosu pomocí kapilární elektroforézy a časově rozlišené fluorescence

Bc. Filip Neupauer

Master's thesis

Analyses of sensors based on Foerster resonance energy transfer by capillary electrophoresis and time-resolved fluorescence

Anotácia:

V této diplomové práci se zabývám různymi spůsoby přípravy senzorů na detekci kaspázy-3 na princípu FRETU. Průbeh reakce je ověřen pomocí kapilární elektroforézy a funkčnost výsledního produktu byla nejdříve testována pomocí změn intenzity fluorescence po přídavku rekombinantní kaspázy-3 na spektrofluorimetru a následne změn v čase vyhasínání fluorescence. Nakonec byli syntetizované senzory použity na dodané apoptotické buňky a interakce s nimi byla pozorována fluorescenčním mikroskopem.

Abstract:

In this thesis I study various methods of synthesis of FRET based sensors for detecting caspase-3. Reaction steps were checked by capillary electrophoresis and synthetised product was first analysed by spectrofluorimeter for changes in fluorescence intensity after adding recombinant caspase-3, followed by measuring fluorescence lifetimes. After that, sensors were used for staining provided apoptotic cells and observed by fluorescent microscope.

Keywords

kvantové tečky, nanočástice, kapilární elektroforéza, časově rozlíšená fluorescence, buňky, FRET, quantum dots, nanparticles, capillary electrophoresis, time resolved fluorescence, cells

Jazyk práce: English

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 21. 5. 2018

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 6. 6. 2018
• Vedúci: doc. Mgr. Petr Táborský, Ph.D.
• Oponent: Mgr. Zdeněk Farka, Ph.D.

Masaryk University

Faculty of Science

Master programme / odbor:
Chemistry / Analytical Chemistry