Sulfan produkující enzymy v kančích spermiích.

Aneta Pilsová

Bakalářská práce

Sulphan-producing Enzymes in Boar Sperm.

Anotace:

Sulfan, který v živých buňkách endogenně vzniká při reakcích katalyzovaných specifickými enzymy, plní funkci signální molekuly. Cílem teoretické části práce bylo shrnutí současných poznatků o funkci sulfanu zejména v samčí reprodukční soustavě a spermiogenezi. V práci jsou shrnuty základní vlastnosti sulfanu a možné cesty vzniku tohoto plynu v živých buňkách. Za produkci sulfanu jsou zodpovědné čtyři sulfan produkující enzymy. Práce byla zacílena konkrétně na cystathionin-beta-syntázu, enzym, který je zodpovědný za produkci sulfanu především v centrálním nervovém sytému, ale také v játrech, ledvinách, ileu, děloze, placentě, ve tkáni penisu, varlete či prostaty. Enzym byl popsán i ve spermiích laboratorních hlodavců. Cílem praktické části bylo prokázat přítomnost CBS v kančích spermiích. V experimentu byly využity vzorky ejakulovaných spermií, spermií kapacitovaných s různou dobou kapacitace v kapacitačním médiu a spermií kapacitovaných v médiu suplementovaném donorem sulfanu. Exprese enzymu ve spermiích byla sledována imunocytochemicky a hodnocena po snímání na konfokálním mikroskopu analýzou obrazu. Přítomnost CBS byla v kančích spermiích prokázána. Exprese enzymu se snižovala v závislosti na délce proběhlé kapacitace.

Abstract:

Endogenous hydrogen sulphide is produced during reactions catalysed by specific enzymes and plays important role as a signalling molecule. The aim of theoretical part of this thesis was to summarize recent knowledge about hydrogen sulphide and his function in reproductive system and about spermiogenesis. The work recapitulates elemental characteristics and metabolism of hydrogen sulphide in living cells. The work was focused on cystathionin-beta-synthase, which is hydrogen sulphide producing enzyme mainly in central nervous system, but also in liver, kidney, ileum, uterus, placenta, penile tissue, testis or prostate. CBS was found also in sperm of laboratory rodents. Practical part was focused on the proof of CBS in boar sperm. During the experiment were used samples with ejaculated sperm of boar, samples of capacitated sperm in defined medium and sperm capacitated in medium supplemented with hydrogen sulphide donor. The expression of enzyme was observed by using imunocytochemistry and it was after evaluated by the scanning confocal microscope image analysis. The presence of CBS was proved in the boar sperm. The expression of enzyme was decreasing according to the duration of capatitation.

Klíčová slova

spermie, cystathionin-beta-syntáza, sulfan, reprodukce

Keywords

sperm, cystathionin-beta-synthase, hydrogen sulphide, reproduction

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 17. 4. 2019

Obhajoba závěrečné práce

• Vedoucí: prof. Ing. Mgr. Markéta Sedmíková, Ph.D.

Česká zemědělská univerzita v Praze

Fakulta agrobiologie, potravinových a přírodních zdrojů

Bakalářský studijní program / obor:
Zootechnika / Zoorehabilitace a asistenční aktivity se zvířaty