Charakterizace stabilní buněčné linie Hek293 exprimující lidský amyloidní prekurzorový protein

Aneta Rotterová

Diplomová práce

Characterisation of stable cell line Hek293 expressing human amyloid precursor protein

Anotace:

Alzheimerova choroba, neurodegenerativní onemocnění, je stále více rozšířeným onemocněním v populaci. Projevuje se poklesem kognitivních funkcí, ztrátou paměti a abnormálním chováním, které pacientům s tímto onemocněním ztěžuje každodenní život. Alzheimerova choroba je velice komplexní onemocnění, u kterého doposud nebyla plně objasněna vyvolávající příčina. Jednou z možných příčin tohoto onemocnění je abnormální akumulace amyloid β-peptidu v mozku pacientů. Amyloid β-peptid je malý peptid vznikající z amyloidního prekurzorového proteinu. Byly pozorovány mutace v genu pro amyloidní prekurzorový protein, které vedly k rozvoji Alzheimerovy choroby. Studium zaměřené na tento protein by mohlo odpovědět některé z otázek týkajících se mechanismu Alzheimerovy choroby. V této práci jsme se zaměřili na tvorbu stabilních buněčných linií Hek293 exprimujících amyloidní prekurzorový protein. Pro tvorbu stabilních buněčných linií bylo využito dvou vektorů. Vektor pcDNA ™ 3.4 TOPO® byl vhodným vektorem pro vytvoření takovéto stabilní linie. Bylo vytvořeno 52 monoklonálních stabilních linií exprimujících amyloidní prekurzorový protein a 8 z těchto linií charakterizovat pomocí polyakrylamidové gelové elektroforézy a Western blottingu.

Klíčová slova

amyloidový prekurzorový protein, amyloid β-peptid, Alzheimerova choroba, monoklonální buněčná linie

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 11. 5. 2021

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 10. 6. 2021
• Vedoucí: Mgr. Monika Schmidt, Ph.D.
• Oponent: PharmDr. Ondřej Benek, Ph.D.

Univerzita Hradec Králové

Přírodovědecká fakulta

Magisterský studijní program / obor:
Chemie / Chemie - spec. toxikologie a analýza škodlivin