Kvalitativní a kvantitativní analýza fotosyntetických pigmentů za pomoci HPLC-(DAD)-MS

Iva HOLUBOVÁ

Bakalářská práce

Qualitative and quantitative analysis of photosynthetic pigments using HPLC-(DAD)-MS

Anotace:

Fotosyntetické pigmenty vyšších rostlin (chlorofyly a karotenoidy) jsou poměrně labilní molekuly, což je nutné zohlednit v průběhu jejich analýzy. Výběr optimálního postupu přípravy vzorků a analýzy se tedy provádí na základě chemických a fyzikálních vlastností pigmentů. Nezbytným krokem před samotnou analýzou pigmentů je příprava jejich extraktů z rostlinného materiálu. Extrakce by měla být dostatečně efektivní a selektivní, ale nemělo by v jejím průběhu dojít k chemické, tepelné či světelné degradaci pigmentů. Degradaci lze zabránit vhodným výběrem extrakčního postupu, extrakčního činidla a nastavením parametrů extrakce. Samotná analýza pigmentů s využitím spojení HPLC-MS také vyžaduje nastavení vhodných parametrů jako například složení mobilní fáze pro HPLC, typ ionizační techniky a hmotnostního analyzátoru. Cílem této bakalářské práce je vytvoření přehledu informací nezbytných pro praktickou analýzu fotosyntetických pigmentů obsažených v listech vyšších rostlin. Na základě tohoto přehledu by měla být vybrána nejvhodnější metoda přípravy vzorků a analýzy fotosyntetických pigmentů pro dané analytické metody. Kvalitativní a kvantitativní analýza pigmentů by měla být prováděna pomocí vysokoúčinné kapalinové chromatografie s detektorem diodového pole (HPLC-DAD) a s hmotnostním detektorem (HPLC-MS).

Abstract:

Photosynthetic pigments of higher plants (chlorophylls and carotenoids) are relatively unstable molecules, which must be taken into account during the analysis. Selection of optimal procedure of sample preparation and analysis is carried out on the basis of chemical and physical properties of the pigments. The preparation of the pigment extracts of plant material is a necessary step prior to the analysis. Extraction should be sufficiently efficient and selective, but during extraction process should not occur the chemical, thermal or light degradation of pigments. Degradation can be prevented by appropriate selection of the extraction process, extraction solvent and setting parameters of extraction. The analysis of pigments using connection HPLC-MS also requires setting appropriate parameters such as the composition of the mobile phase for HPLC, type ionization techniques and mass analyzer . The aim of this bachelor thesis is to summarize the information necessary for practical implementation analysis of photosynthetic pigments contained in the leaves of higher plants.. Based on this overview should be selected the most suitable method of sample preparation and analysis of photosynthetic pigments for the given analytical method. Qualitative and quantitative analysis of pigments should be performed using high performance liquid chromatography with diode array detector (HPLC-DAD) and mass spectrometer (HPLC-MS).

Klíčová slova

Fotosyntetické pigmenty, extrakční postupy, HPLC, ESI, APCI, kvadrupólový analyzátor, TOF, iontová past, tandemová hmotnostní analýza

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 22. 4. 2013

Zveřejnit od: 22. 4. 2013

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 21. 5. 2013
• Vedoucí: Mgr. Jakub Nezval

OSTRAVSKÁ UNIVERZITA V OSTRAVĚ

Přírodovědecká fakulta

Bakalářský studijní program / obor:
Biologie / Experimentální biologie