Studium metabolismu xenobiotik pomocí moderních elektromigračních metod.

Mgr. Monika Langmajerová

Bakalářská práce

Study of xenobiotics metabolism by means of modern electromigration methods

Anotace:

U člověka bylo nalezeno 57 proteinů cytochromů P450. Z nich se přibližně 15 podílí na metabolismu léčiv a ostatních xenobiotik. Cytochrom P450 2D6 se podílí na metabolismu nejméně 25 % běžně předepisovaných léčiv. Mezi tyto léčiva patří i dextromethorfan. Tato látka se používá jako účinná složka ve volně prodejných přípravcích proti kašli. V rámci této bakalářské práce byla optimalizována off-line metoda pro souběžné stanovení metabolitů vznikajících při reakci dextromethorfanu s rekombinantním enzymem SupersomeTM CYP2D6*1. Tato metoda je rychlá a jednoduchá, s nenáročnou přípravou vzorku. Byly sestaveny kalibrační závislosti s korelačním koeficientem vyšším něž 0,993. Poté byly stanoveny aktivity tohoto isoenzymu CYP2D6 vzhledem k vzniku MEM a DTR při různých teplotách. Číslo přeměny při 37 °C se shoduje s hodnotami dostupnými v literatuře.

Abstract:

The human genome encodes fifty-seven cytochrome P450 proteins. Nearly fifteen P450s are involved in the metabolism of drugs and other xenobiotic chemicals. Cytochrome P450 2D6 is responsible for the metabolism of at least 25% common prescibed drugs. One of these drug is dextromethophan that is an antitussive component of many over-the-counter cough medications. In this bachelor thesis the CE method for concurrently determination of dextromethorphan and its metabolites was optimized. Metabolites were prepared by the off-line incubation with SupersomeTM CYP2D6*1. It is a fast method and no sample pretreatment was applied. Linear relationships were observed for concentration the peak responses with correlation coefficients above 0,993. Finally O-demethylation and N-demethylation catalytic activities of enzyme in different temperatures was determined. Turnover number in 37 °C is corresponding with data from literature.

Klíčová slova

cytochrom P450, CYP2D6, dextromethorfan, kapilární zónová elektroforéza, CZE, xenobiotika, metabolismus léčiv, cytochrome P450, dextromethorphan, capillary zone electrophoresis, xenobiotics, drug metabolism

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 13. 5. 2010

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 14. 6. 2010
• Vedoucí: prof. RNDr. Zdeněk Glatz, CSc.
• Oponent: Mgr. Jindra Smutná, Ph.D.

Masarykova univerzita

Přírodovědecká fakulta

Bakalářský studijní program / obor:
Biochemie / Biochemie