Konfokální Ramanova mikroskopie buněk

Bc. Monika HARVANOVÁ

Diplomová práce

Confocal Raman microscopy cells

Anotace:

Práce představuje metodu konfokální Ramanovy mikroskopie a možnost jejího využití pro zobrazení fixovaných buněk a vnitrobuněčného prostředí. Metoda je založená na identifikaci vlastních biochemických znaků biomolekul projevujících se v Ramanově spektru buňky, obchází tak nutnost jejich specifického značení. Práce zároveň představuje možnost aplikace metody pro zobrazení distribuce léčiva v buňce bez použití externího značení. Pro Ramanovo zobrazení buněk a některých buněčných kompartment byly experimenty provedeny na fixovaných buňkách buněčné linie MCF-7. Ramanovo zobrazení umožnilo identifikaci jádra a oblastí membránových organel v cytoplasmě. Zároveň jsou popsány některé specifické znaky těchto buněčných kompartment v Ramanově spektru buňky. Pro Ramanovo zobrazení distribuce léčiva v buňce byly buňky U2OS v růstovém médiu 1 h inkubovány s 300 ?M roztoky jednotlivých potenciálních léčiv ze skupiny metalokarboranů a poté fixovány. Výsledky jsou zobrazením distribuce tří vybraných metalokarboranů ve vnitrobuněčném prostředí bez použití externího značení.

Abstract:

The aim of this work is to introduce confocal Raman microcopy as a potential method for imaging of fixed cells and intracellular environment. The method is based on the identification of specific biochemical features of biomolecules which are reflected in the Raman spectrum of the cell. In connection with this, Raman microscopy doesn´t require any external labels. The work also introduces this method as a potential tool for studying of drug distribution in cell without using external labels. For Raman imaging of cells and some cellular compartments, fixed MCF-7 cells were used. Raman imaging allowed to visualize nuclei and membrane organelles regions in the cytoplasm. Some of the spectral features of these compartments in Raman spectrum is shown. For Raman imaging of drug distribution, U2OS cells were exposed to 300 ?M solutions of selected metalocarboranes in growth medium for 1 h and then fixed. The results show distribution of three metalocarboranes in cell environment without using external label.

Klíčová slova

konfokální Ramanova mikroskopie, Ramanovo zobrazení, distribuce léčiva

Jazyk práce: čeština

Datum vytvoření / odevzdání či podání práce: 2. 5. 2013

Zveřejnit od: 2. 5. 2013

Obhajoba závěrečné práce

• Obhajoba proběhla 27. 5. 2013
• Vedoucí: Mgr. Vlastimil Mašek, Ph.D.

UNIVERZITA PALACKÉHO V OLOMOUCI

Přírodovědecká fakulta

Magisterský studijní program / obor:
Biochemie / Biochemie