Zpracování histologického materiálu metodou cytobloku

Denisa KRČMÁRIKOVÁ

Bachelor's thesis

Elaboration of a histological material by cytoblock method

Abstract:

Zpracování histologického materiálu metodou cytobloku se v laboratořích používá především při vyšetření cytologických materiálů, jako jsou punktáty, aspiráty či kartáčkové stěry. Pro tyto materiály se častěji používá nátěr na sklo, cytoblok má však výhodu v možnosti využití doplňkových metod, například imunohistochemických. Přítomnost tekutiny v coelomových dutinách je fyziologická, slouží zde k lubrikaci, ovšem při jejím nadměrném množství se jedná o projev patologických procesů v těle. Ve správně odebraných vzorcích se nachází buňky, které napomáhají k určení diagnózy pacienta, například k odhalení nádorových buněk. Příčiny vzniku většího objemu tekutiny se však pohybují v počtu desítek, proto je nutná korelace s klinickými údaji pacienta. Tato práce je zaměřena na laboratorní zpracování tekutých vzorků. Cílem metody cytobloku je dosáhnout co nejvyšší výtěžnosti buněčných elementů a zpracování adekvátního preparátu k mikroskopickému vyšetření. Obecná část je zaměřena na poznatky z cytologie, cytologické vzorky pro cytoblokové vyšetření a metody barvení. Praktická část zahrnuje makroskopické a mikroskopické hodnocení materiálu, porovnání dvou možných metod zpracování, pomocí želatiny a celoidinu. Pod praktickou část spadá také odvodnění materiálu, zalití do parafínu, krájení, odparafínování, barvení a montování preparátů. Různé druhy barvení, kterými jsou hematoxylin-eosin, Papanicolaou a May-Grünwald-Giemsa, jsou mikroskopicky zhodnoceny a porovnány. V závěru je práce doplněna zhodnocením buněčného zastoupení, celularity a rozložení buněk ve zpracovaných preparátech a také porovnáním materiálu odebraného s časovým odstupem od stejného pacienta.

Abstract:

The processing of histological material by cell block method is used in laboratories mainly for the examination of cytological materials such as punctates, aspirates or brush swabs. Slide coating is more often used for these materials, but the cell block has the advantage of using additional methods such as immunohistochemical. The presence of fluid in coelom cavities is physiological, used for lubrication, but excessive quantity indicates the presence of pathological processes in the body. Properly collected samples contain lots of cells that help diagnose the patient, for example to detect tumor cells. However, there are dozens of causes for a larger volume of fluid, therefore the correlation with the patient´s clinical data is necessary. My work is focused on processing of liquid samples. The aim of the cell block method is to achieve the highest yield of cellular elements, processing an adequate preparation for microscopic examination. The general part is focused on knowledge of cytology, cytological samples for cell block examination and methods of staining. The practical part includes macroscopic and microscopic evaluation of the material, and comparison of the two processing methods, using gelatine and celloidin. The practical part also includes drainage of the material, embedding in paraffin, slicing, dewaxing, staining and assembly of preparations. Different types of staining, such as hematoxylin-eosin, Papanicolaou and May-Grünwald-Giemsa are microscopically evaluated and compared. In conclusion, the work is supplemented by evaluation of cell representation, cellularity and cells distribution in processed preparations, comparing the material taken with a time lag from the same patient.

Keywords

Cytoblok, parafín, cytologie, celoidin, želatina, centrifuga

Language used: Czech

Date on which the thesis was submitted / produced: 2. 6. 2020

Thesis defence

• Supervisor: MUDr. Jiří Dušek

UNIVERSITY OF SOUTH BOHEMIA IN ČESKÉ BUDĚJOVICE

Faculty of Health and Social Sciences

Bachelor programme / field:
Specialization in Health Service / Health Technician